植物生理学 实验8_植物抗逆性的鉴定.pptVIP

实验九 高温胁迫对植物细胞膜的伤害 1. 实验目的 ■ 学习电导仪法测定膜相对透性的方法 ■ 理解逆境对植物膜透性的影响 2. 实验原理 植物细胞膜起调节控制细胞内外物质交换的作用，它的选择透性是其最重要的功能之一。 当植物受到逆境影响时，如高温或低温，干旱、盐渍、病原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，膜的透性增加，选择透性丧失，细胞内部分电解质外渗，以致植物细胞浸提液的电导率增大。 膜结构破坏的程度与逆境的强度、持续的时间、作物品种的抗性等因素有关。因此，质膜透性的测定常可作为逆境伤害的一个生理指标，广泛应用在植物抗性生理研究中。 当质膜的选择透性被破坏时细胞内电解质外渗，其中包括盐类、有机酸等，这些物质进入环境介质中，如果环境介质是蒸馏水，那么这些物质的外渗会使蒸馏水的导电性增加，表现在电导率的增加上。植物受伤害愈严重，外渗的物质越多，介质导电性也就越强，测得的电导率就越高（不同抗性品种就会显示出抗性上的差异。） 本实验采用电导率法测定电解质的相对外渗率，来了解胁迫情况下植物受害的程度。 伤害率 本次实验测定高温对植物细胞膜的伤害 电导率 K=GQ Q:电极常数（电导仪本身决定） G:实测电导值 伤害率（％）＝ 3 材料、仪器设备及试剂 （一）材料：梧桐叶片； （二）仪器设备： 1. 电导仪；2.打孔器；3. 真空干燥器； 4. 恒温水浴锅； 4 实验步骤 1) 打取叶圆片：自选叶片，洗净吸干，避开叶脉打取30个叶圆片, 放入1支试管, 再打取30个叶圆片,放入另1支试管, 依此类推, 每支试管皆放入30个叶圆片； 2) 试管分别编号为：1A,1B, 2A,2B ……5A,5B，每管加入15ml纯水, 抽真空15min； 3) 水浴处理：5组(1A1B,2A2B ……5A5B)分别在60℃水浴0，10，20，30，40min，取出后用自来水冷却10分钟； 4) 测量电导率：用电导仪测定浸泡溶液的电导率（分组单独领取电导仪，详细使用方法分组指导）； 5) 煮沸电导率：测过电导率的10支试管再放入100℃沸水浴中15min，以杀死植物细胞，使细胞内溶物全部泄露出来，取出试管后用自来水冷却10min，测其煮沸电导率。 电导仪的使用方法 电源开关“开”，预热； 打开（测量/校正）拨至“测量”；（补偿/一般）拨至“一般”；（×1/×10-2）拨至“×1”；量程范围选“×103”，使待测值介于0.1～0.999之间。 每次往待测液中插入电极时，都要首先用纯水冲洗电极，并用吸水纸轻轻拭干。 5 数据记录与处理 6 实验结果及分析 计算电导率时，取2支试管的平均值 计算伤害率 比较不同处理的叶片细胞透性的变化情况，记录结果，并加以解释 以伤害率同处理时间的关系作图并分析 7 注意事项 整个过程中，叶片接触的用具必须绝对洁净（全部器皿要洗净），也不要用手直接接触叶片，以免污染。 水浴加热隔3分钟摇一次，测量前也要摇匀； 煮沸时单管要分开，否则沸水窜入试管； 每次往待测液中插入电极时，都要首先用纯水冲洗电极，并轻轻拭干。 * * 处理电导率 煮沸电导率 ×100％ 5B 4B 3B 2B 1B 重复2管号 5A 4A 3A 2A 1A 重复1管号 40 30 20 10 0 高温处理 时间（min） 30 min 20 min 伤害率 （Ct／ C100 ）×100 煮沸电导率 平均值C100 处理电导率 平均值Ct 电导值 A B 0 10 min ? ? ? ? ? ? 40 min 表1 高温对叶片伤害率的影响 *