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抓住3个基础知识点;一、微生物的实验室培养
1.培养基
(1)概念:人们按照微生物对__________的不同需求,配制出供其__________的营养基质。
(2)营养构成:一般都含有_______________和无机盐。此外还需要满足微生物生长对_____、氧气以及_____________的要求。
(3)种类:按照物理性质可分为_____培养基和固体培养基。;2.无菌技术
(1)关键:防止__________的入侵。
(2)不同对象的无菌操作方法(连线):
方法 类型 对象
①灼烧灭菌 Ⅰ接种针(环)
②干热灭菌 a.消毒
③巴氏消毒 Ⅱ培养皿
;
④紫外线 b.灭菌
⑤化学药物 Ⅲ操作者双手
⑥高压蒸汽
灭菌 Ⅳ水源地
【提示】 ①、②、⑥-b-Ⅰ、Ⅱ ③、④、⑤-a-Ⅲ、Ⅳ;称量 ;③常用的微生物接种方法有两种:
a.平板划线法:是通过接种环在琼脂固体培养基表面________________,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
b.稀释涂布平板法:是将菌液进行一系列的_________,然后将____________的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。;
(3)菌种的保存方法:
①对于频繁使用的菌种,可以采用__________的方法。
②对于需要长期保存的菌种,可以采用__________的方法。;二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1.分离原理
土壤中细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成____,这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到_____作用。
2.统计菌落数目
统计样品中的活菌一般用_____________法。
3.实验流程
土壤取样→_____________→微生物的培养与观察→细菌的_____。;三、分解纤维素的微生物的分离
1.纤维素酶
(1)组成:纤维素酶是一种________,一般认为它至少包括三种组分,即________________________。
(2)作用:;2.纤维素分解菌的筛选
(1)原理:
(2)筛选方法:_______染色法,即通过是否产生________来筛选纤维素分解菌。
(3)培养基:以________为唯一碳源的选择培养基。;(4)实验流程:
土壤取样:富含________的环境
↓
选择培养:用___________培养,以增加纤维素分解菌的浓度
↓
__________:制备系列稀释液
↓
涂布平板:将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
??
挑选产生________的菌落;考点一 微生物的实验室培养
一、培养基
1.培养基的成分;营养物质;2.培养基的分类;二、消毒和灭菌的比较;
三、纯化培养技术
1.原理
在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。
;
2.微生物接种方法
(1)平板划线法:
①原理
平板划线法中细胞的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的划线和移动过程中。在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成纯种的单个菌落。(如下图);②方法
;(2)稀释涂布平板法:10倍系列稀释操作。
a.将分别盛有9 mL水的6支试管灭菌,并按101~106的顺序编号。
b.进行梯度稀释时,从菌液开始,每次从前一试管中取1 mL溶液注入到下一试管中混匀。
c.进行涂布平板操作。 ;1.(2013·新课标全国卷Ⅱ)临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题:
(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用________法或________法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。;(2)取该单菌落适当稀释,用________法接种于固体培养基表面,在37 ℃培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。
(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A________;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B________; ;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明 ______________________________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的 ________。
(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素 ________。
【答案】 (1)平板划线 稀释涂布平板(或涂布) (2)涂布 (3)敏感 不
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