微生物学第10章-微生物的遗传与变异2-第11章-菌种选育与保藏.pptVIP

“U”型管实验（ Bernard Davis，1950 ） 证实接合过程需要细胞间的直接接触 U形管中间的滤板，允许培养基的营养物质通过，但细菌无法通过。 F因子（F质粒/致育因子） 1、性状—含F质粒菌株，有1-4根性菌毛； 2、特点—F因子可游离于细胞内，也可插入或整合到染色体上（附加体）； 3、F因子的分子量通常为5×107，上面有编码细菌产生性菌毛（sex pili）及控制接合过程进行的20多个基因。 4、F因子的四种细胞形式 根据细胞中是否存在F因子以及其存在方式的不 同，把E.coli分成四种菌株。 ①F－菌株：不含F因子，没有性菌毛，但可以通过接合作用接收F因子而变成雄性菌株（F+）； ②F＋菌株： F因子独立存在，细胞表面有性菌毛。 ③Hfr（高频重组）菌株：F因子插入到染色体DNA上，细胞表面有性菌毛。 ④F’菌株：Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时，形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子，称为F′因子。细胞表面同样有性菌毛。 F－、 F＋、 Hfr、 F′菌株之间的关系 （1） F＋×F－杂交 杂交的结果：供体细胞和受体细胞均成为F＋细胞，即： F＋×F－＝ F＋＋F＋ F＋菌株的F因子向F-细胞转移，但含F因子的宿主细胞的染色体DNA一般不被转移。 5、接合机制 Hfr菌株的F因子插入到染色体DNA上，因此只要发生接合转移过程，就可以把部分甚至全部细菌染色体传递给F-细胞并发生重组，由此而得名为高频重组菌株。 Hfr+F-→Hfr+(F-) （2）Hfr ×F－杂交 （二）诱发变异的机制 1、化学诱变剂引起的突变 （1）碱基对直接置换（即一对碱基被另一对碱基所置换,分为转换和颠换。） 如：常用的亚硝酸、羟胺和各种烷化剂（硫酸二乙酯，甲基磺酸乙酯，N-甲基-N’硝基-N-亚硝基胍，N-甲基-N-亚硝基脲，乙烯亚胺，环氧乙酸，氮芥等）。 亚硝酸的诱变机制,使碱基发生氧化脱氨，腺嘌呤A变成次黄嘌呤H，胞嘧啶C变成尿嘧啶U。 能引起颠换的诱变剂很少，只是部分烷化剂才有。 ①腺嘌呤经氧化脱氨后变成烯醇式次黄嘌呤（He），He通过互变异构效应形成酮式次黄嘌呤（HK） 。 ②DNA双链第一次复制，结果Hk在6位上含有酮基，故只能与6位上含有氨基的胞嘧啶C配对。 ③DNA双链第二次复制，其中胞嘧啶（C）正常与鸟嘌呤（G）配对，使A-T → G-C ，从而实现转换。 ④当胞嘧啶被氧化成尿嘧啶（U）时，也可实现G-C → A-T 。 AT GC GC AT 碱基置换在编码蛋白的基因中的可能作用：DNA单一密码子的改变产生不同的蛋白。 （2）碱基类似物引起的间接置换（5-BU，5-AU， 8-NG） 5-BU是T的结构类似物， 一般以酮式状态存在，可与A配对；有时以烯醇式状态存在，当DNA进行复制时，就只能与G配对。 G再正常的与C配对，完成A-T转换成G-C。 硝酸与5-BU的诱变机制异同 亚硝酸 5-BU 直接作用于原有碱基，改变其结构 掺入DNA代谢，替代正常碱基 对繁殖细胞、休止细胞都有作用 仅对繁殖细胞有作用 子二代出现转换 子三代出现转换 可发生回复突变 可发生回复突变 （2）移码突变（frame-shift mutation） 一种诱变剂引起DNA分子中一个或几个核苷酸的增加或缺失，从而造成突变点以后的全部遗传密码的转录和翻译都发生错误。 例，原黄素、吖啶黄等吖啶类染料均可引起移码突变，增加一个碱基的距离，3.4?。 （3）染色体畸变 某些理化因子，引起DNA的大损伤。包括染色体结构上的缺失、重复、插入、易位和倒位，也包括染色体数目的变化。 ①缺失 是指染色体丢掉了某一区段。因而会失去某些基因，并直接影响到基因的排列顺序、基因间的相互关系。 ②重复 是指染色体上个别区段的增加。 ③倒位 是指正常染色体的某区段断裂后，断裂的片段倒转180度又重新连接愈合。 ④易位 是染色体上一区段断裂后再顺向或逆向地插入到同一条染色体的其他部位上。对于染色体间畸变，则指非同源染色体间的易位。 诱变因素 在DNA上的初级效应 遗传效应 碱基类似物 掺入作用 AT=GC双向转换 羟 胺 与胞嘧啶起反应 GC→AT的转换 亚硝酸 A、G、C的氧化脱氨作用 AT=GC双向转换