植物生理学 实验5呼吸速率的测定.pptVIP

实验四 呼吸速率对不同环境温度的响应  实验目的 学习呼吸强度的碱吸收测定方法； 了解环境因素（如温度）对呼吸强度的影响。 呼吸速率是植物生命活动最重要的指标之一。测定呼吸速率的方法很多，可以分成两大类：测定吸O2速率或者测定放出CO2速率。前者有测压法、氧电极法；后者有小篮子法、红外线CO2气体分析仪（IRGA）等方法。 测压法、氧电极法是测定植物呼吸过程对O2的吸收，样品用量少，且精确度高。 利用红外线CO2气体分析仪测定植物呼吸速率比较快速、准确，是科研上常采用的方法。 小篮子法原理 植物进行呼吸时放出CO2，计算一定的植物样品在单位时间内放出CO2的数量，即为该样品呼吸速率。 呼吸放出的CO2可用氢氧化钡溶液吸收，实验结束后用已知浓度的草酸溶液滴定剩余的碱液，从空白和样品二者消耗草酸溶液之差即可计算出呼吸过程中释放的CO2的量。 Ba(OH)2 +CO2 →BaCO3↓+ H2O Ba(OH)2（剩余）+ H2C2O4→BaC2O4↓+ 2H2O 材料和仪器设备 （一）材料： 发芽的小麦种子和煮熟的小麦种子 （二）仪器设备： 1. 呼吸测定装置（小篮子）； 2.电子天平； 3.酸式及碱式滴定管。 试 剂 1） 饱和Ba(OH)2溶液 2） 1／44mol/L 草酸溶液 3） 酚酞指示剂 实验步骤 ?1. 取500mL 广口瓶3个，瓶口瓶用橡皮塞塞紧，瓶塞下面挂一铁丝小篮，以便装植物样品，整个装置即谓“广口瓶呼吸测定装置”。 实验步骤 2. 分别称取活种子各10g，分别放入3个小篮子中； 3. 分别在3个广口瓶中各加入20ml饱和Ba(OH)2溶液； 4. 将3个小篮子分别挂在广口瓶内，盖紧瓶塞，在室温、低温（冰箱4°C冷藏室）和高温（40°C）中处理20min ，经常摇动，以破坏碱液表面的硬膜； 5. 20min后，取出广口瓶中的小篮子，加入1-2滴酚酞指示剂，盖紧瓶盖； 实验步骤 6. 用草酸滴定广口瓶中的碱液至红色刚好消失为止，记录各个温度处理中的草酸用量V2 ； 7. 空白测定：清洗1个刚才用过的广口瓶，小篮子中加入10g死种子，在瓶内准确加入饱和Ba(OH)2溶液20ml，立即塞紧瓶塞，充分摇动广口瓶2min，待瓶内CO2全部被吸收后，拔出小橡皮管塞，加入酚酞指示剂1滴，用草酸溶液进行滴定，直到红色刚刚消失为止，记录空白对照的草酸用量V1 。 ? 结果计算 ?呼吸速率v（mg CO2/g(FW)/h： ?? 上式中，V1：空白滴定用去的草酸量（ml） V2：处理滴定用去的草酸量（ml） 数据记录与处理 注意事项 防止口中呼出的气体进入广口瓶！ 滴定时使用有孔的盖子，通过小孔进行滴定！ 思考题 1、实验期间，为什么要不时地摇动广口瓶？ 2、本实验为什么要塞紧广口瓶的盖子？ 2008年全国硕士研究生入学统一考试农学门类联考 若某一植物组织呼吸作用释放CO2摩尔数和吸收O2摩尔数的比值小于1，则该组织在此阶段的呼吸底物主要是： A. 脂肪 B. 淀粉 C. 有机酸 D. 葡萄糖 * * ①最适温度: 25-35℃ 呼吸最适温度＞光合 最适温度 ②最低温度：0℃左右 (冬小麦: 0-7℃，松树针叶: -25℃) ③ 最高温度：35-45℃ 温度 预先将豌豆幼苗放在25℃下，培养4天，其相对呼吸速率为10，在放到不同温度下培养3h, 测定相对速率的变化 呼吸速率：通常指单位时间内单位鲜重/干重组织或原生质释放的CO2量或吸收O2量。 注：酚酞是一种弱有机酸，在pH＜8.2的溶液里为无色的内酯式结构，当pH＞8.2时为红色的醌式结构。 ? ? ? ? 高温 ? ? ? ? 室温 ? ? ? 低温 呼吸速率 （mgCO2·g-1 FW· h-1） 空白与处理草酸用量差值（ml） 处理滴定 草酸用量 V2（ml） 空白滴定 草 酸用量 V1（ml） 处理