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绿叶中色素的提取与分离实验的改进和创新
安仁二中 谭波涛
一、实验在教材中所处的地位与作用
本实验是高中生物必修一《分子与细胞》中光合作用一节内容,是高中生物教学中的一个重要实验,光合作用是生物界最基本的物质代谢与能量代谢,也是高中生物学习的重点和难点内容。叶绿体中色素在光合作用中起着吸收、传递与转化光能的作用,做好绿叶中色素的提取和分离实验,有助于学生理解光合色素的种类和作用、加强学生对光合作用的理解和掌握,培养学生提取、分离、观察叶绿体中色素的技能。?
二、实验原型及不足之处
1、第一步提取绿叶中的色素,使用研磨法,步骤繁琐,需要较多的绿叶(5g)和无水乙醇(10ml),用到的药品种类比较多(包括二氧化硅和碳酸钙等),研磨时要求迅速、充分,学生难以把握,而且提取液中色素含量不高,色素分离不明显。
2、第三步画滤液细线,画线工具毛细吸管很细易断,而且画滤液细线时,线画得较粗且不直,很难符合要求。
3、第四步分离绿叶中的色素,用到的层析液,成分是石油醚、丙酮、苯,这些物质挥发性强,有刺激性气味,而且有毒,使用书上介绍的方法,用烧杯及培养皿的装置封闭不严,有毒物质易散发出来,对学生的身心健康不利,而用试管密封层析装置,又不便于装入滤纸条和加层析液,加层析液的量也很难控制。
三、实验创新与改进之处
1、提取绿叶中的色素方法改进
将原实验中的研磨法改为水浴加热法。将绿叶剪碎加入无水乙醇,进行水浴加热提取绿叶中的色素。
2、画滤液细线改进
将原实验中画滤液细线工具毛细吸管改为自制画线器,用自制画线器蘸取提取液,画滤液细线。
3、分离绿叶中的色素改进
改进教材传统层析装置,用自制可控式密闭层析装置层析。将滤纸条装入玻璃管后,在密闭条件下进行层析观察和层析液的回收。
四、实验器材
新鲜的绿叶,无水乙醇、层析液,天平、剪刀、培养皿、镊子、玻璃棒,烧杯、试管、试管夹、三角架、石棉网、酒精灯、火柴、胶头滴管、载玻片、干燥的定性滤纸、量筒、自制画线器、自制层析装置。
五、实验原理及装置说明(包括实验装置平面图)
1、实验原理:较高温度能破坏绿叶细胞的生物膜,叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中,所以,可以通过水浴加热法用无水乙醇提取绿叶中的色素。绿叶中的色素不只一种,它们都能溶解在层析液中。然而,它们在层析液中的溶解度不同:溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快;反之则慢。这样,几分钟之后,绿叶中的色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。
2、实验装置及说明
自制画线器:由橡皮塞和盖玻片组成。水浴加热装置:
自制画线器:
由橡皮塞和盖玻片组成。
水浴加热装置:
由三角架、石棉网、酒精灯、烧杯、试管、试管夹组成。
自制可控式密闭层析装置:
由铁架台、玻璃管、橡皮塞、一次性注射器组成。
六、实验过程
1、提取绿叶中的色素
取2克绿色叶片剪碎,装入试管中,加入2-3ml无水乙醇,在沸水浴中加热3分钟左右,用橡皮塞塞好稍冷备用。
2、制备滤纸条
取一干燥的定性滤纸,将滤纸剪成长10cm、宽1cm的滤纸条,在滤纸条一端剪去两角。
3、画滤液细线
用胶头滴管吸取少量色素提取液,滴一滴在载玻片上,拿着画线器,用盖玻片边缘蘸取少量提取液,轻轻按在准备好的滤纸条上要画滤液细线的位置,待稍干后再进行2-3次。
4、分离绿叶中的色素
先将滤纸条用悬挂在橡皮塞上的回形针固定,调好高度装入玻璃管中,塞好,按压注射器加入适量的层析液(注意要轻缓,不要让层析液没及滤液细线),层析完成后用注射器回收层析液,用于下次实验。
5、观察与记录滤纸条上的色素带
观察试管内滤纸条上出现了几条色素带,以及每条色素带的颜色。并将观察结果记录下来。
七、实验效果:
实验改进后步骤少,操作容易,节省材料和药品,提取液色素含量高,实验易于成功;用画线器画出的滤液细线细而直,更符合要求;用自制层析装置进行层析,操作简单,装置密闭性好,有毒层析液释放少,减少学生与有毒物质的接触,对学生的身心健康很有好处,还可及时回收层析液。
八、自我评价
这个实验通过改进后,一方面实现了化难为易,色素的提取和画滤液细线更容易进行;第二方面材料和药品消耗减少,符合节约的原则;第三方面通过减少有毒物质的释放,加强药品的回收,改善了实验环境,符合绿色环保的要求。因此我觉得改进后的实验有推广的价值。
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