急性脊髓损伤大鼠移植骨髓间充质干细胞后神经功能恢复及Nogo-A表达的影响-临床医学神经病学专业论文.docxVIP

福建医科大学硕士学位论文 福建医科大学硕士学位论文 - - PAGE 10 - 目 录 一．中文摘要?????????????????????????3 二．英文摘要?????????????????????????4 三．前言???????????????????????????6 四．材料和方法????????????????????????9 五．结果???????????????????????????17 六．讨论???????????????????????????26 七．结论???????????????????????????29 八．参考文献?????????????????????????30 九．综述???????????????????????????36 一．中 文 摘 要 目的：探讨骨髓间充质干细胞 BMSCs（Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells） 经大鼠尾静脉移植对大鼠急性脊髓损伤 SCI（Spinal cord injury）后神经功 能的恢复及对 Nogo-A 表达水平的影响。 方法：采用全骨髓贴壁方法分离、培养、纯化骨髓间充质干细胞，大鼠急性脊 髓损伤模型采用改良艾伦法建立。实验采用成年的雌性 SD 大鼠 96 只，随机 性分成 4 个组，24 只/组，分别是假手术组，SCI 组，Vehicle 组，BMSCs 治疗组。骨髓间充质干细胞 BMSCs 移植前，用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚 胺酯（carboxyfluorescein Succinimidyl Ester,CFSE）标记。BMSCs 组于造 模成功 10 分钟后，自大鼠尾静脉注射 BMSCs 悬液 1ml（5×106 个 BMSCs）； vehicle 组则注射同等剂量的 PBS。 分别在术后第 1 天、第 3 天、第 7 天和第 14 天采用 BBB 神经行为学评分对神 经行为功能进行评估，观察其神经行为功能恢复情况，采用免疫组化及 RT-PCR 法测定脊髓 Nogo-A 表达水平。 结果：BMSCs 大鼠移植 BMSCs 成功后，可以在脊髓损伤神经的周边组织区域中， 观察到阳性 CFSE 染色细胞； BMSCs 大鼠组损伤后第 7 天和第 14 天神经功能 评估明显优于损伤对照组、溶剂对照组；大鼠 BMSCs 组术后第 3 天、第 7 天和 第 14 天脊髓损伤区周边神经组织中 Nogo-A 表达比较损伤对照组和溶剂对照 组，均有明显降低(P0.01)。. 结论：急性脊髓损伤大鼠移植骨髓间充质干细胞，促进损伤后大鼠脊髓神经行 为功能的康复，部分机制与骨髓间充质干细胞抑制或下调脊髓组织中 Nogo-A 的生成有关。 关键词：骨髓间充质干细胞；脊髓损伤；神经功能；Nogo-A 二．英文摘要 Abstract Objective： To investigate the effects of intravenous administration of bone marrow-derived mesenchymal stem cells（BMSCs）into rat tail vein on the recovery of neurological functions and the formulation of Nogo-A after acute spinal cord injury. Method: Bone marrow-derived mesenchymal stem cells were harvested and purified following adherence technique. The rat model of acute spinal cord injury was established with modified Allen’s method.In short ninety-six female adult Sprague-Dawley rats were randomized into four groups ，and each group is twenty-four.There are Sham-operated group， SCI group，Vehicle group and BMSCs-treated group. About 5×106 cells were injected into tail vein at 10minutes after SCI . The vehicle group was injected with the same dose of PBS. BMSCs were labeled by CFSE before the tra