冷鲜猪肉中甲单胞菌分离及其鉴定方法.docVIP

冷鲜猪肉中假单胞菌分离及其鉴定方法 知识背景 革兰氏染色机制： 革兰氏染色反应与细菌细胞壁的化学组成和结构有着密切的关系。目前大多 认为，经过染色和媒染之后，在细菌的细胞膜或细胞质上染上了结晶紫--腆的复 合物。革兰氏阳性菌由于细胞壁较厚，肽聚糖网层次多，交联度高，结构较紧密， 故用95%乙醇脱色时，肽聚糖网孔会因脱水而明显收缩，加上革兰氏阳性菌的细 胞壁基木上不含脂类，乙醇处理时不能在壁上溶岀缝隙。因此，结晶紫--碘复合 物仍被牢牢的阻留在细胞壁以内，使菌体呈现紫色。反之，革兰氏阴性菌的细胞 壁较薄，肽聚糖层薄，交联度低，结构疏松，用乙醇来处理的时候，肽聚糖网孔 不易收缩。同时，由于革兰氏阴性菌的外壁层脂类含量较高，当乙醇将脂类溶解 后，细胞壁上就会出现较大缝隙为使其通透性增大，所以结晶紫--碘复合物就会 被溶出细胞壁。这时再用番红等红色染液进行复染，这可使革兰氏阴性菌发细胞 壁呈现复杂的红色，而革兰氏阳性菌则仍然呈现紫色。 涂布T板法英文名为spread plate method,由于将食菌材料现加到还较烫的 培养基屮再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，而且采用稀释倒平台法也会使一 些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究 中更常用的纯种分离方法是涂布平板法。 徒步平板法分离: 由于需要分离的菌种是假单胞菌，所以选择的培养基只要实验室通用的牛肉 膏