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致突变性检测(Ames试验) 结果判断 突变率(MR):每皿诱变菌落均数与每皿自发回变均数的比值。 MR2: Ames试验 MR2 Ames试验 生物稳定性检测——AOC 1 概念 生物可同化有机碳(AOC),是指能被细菌利用并合成细菌细胞的那部分有机物,是饮用水指异养细菌生长的主要碳源。 2 意义 AOC作为异养细菌在给水管网中再生长潜力的评价指标,饮用水生物稳定性高 ,则表明水中细菌生长所需的有机营养基质少 ,细菌不易在其中生长 ;反之则容易发生细菌再生长问题。 生物稳定性检测——AOC 3 测定原理 一般采用先后接种发法,是由荷兰Van der kooij 博士首先提出,后来又有人经过几次改进。 以饮用水中普遍提出的荧光假单孢菌P17和螺旋菌NOX菌株为测试菌株,以乙酸钠为标准基质,分别取一定体积的水样于经过无碳化处理的磨口玻璃瓶中,尽快运回实验室,接种两种菌进行培养,达到平台期后进行平板计数,根据乙酸碳的产率系数分别计算出P17和NOX的AOC值,2者之和就是试验结果。 粪性链球菌 在人和动物的粪便中都存在有不少的链球菌,称为粪链球菌。它是一群革兰氏阳性、过氧化氢酶阴性,呈短链的球菌。检验方法检验方法《城镇建设行业标准》(CJ/T 148-2001)中,有发醇法和滤膜法。 粪性链球菌可以作为粪便污染的指示生物,对它进行检验,可以提供有价值的数据,用以补充湖泊、溪流和河流中细菌学质量方面的资料。由于它们在环境中存活的有限,在测定水质时,不可只用粪性链球菌作为指标;与粪大肠菌的数据联合研究,由于某些粪性链球菌具有专门的宿主,在水质检验时根据粪性大肠菌群与粪性链球菌菌数的比值,可以提供有关污染源方面的比较确定的情报 亚硫酸盐还原梭菌 是欧共体水质标准中生活饮用水水质的检测指标。 亚硫酸盐还原梭菌是一种能还原亚硫酸盐,形成芽孢的厌氧梭菌。检验方法检验方法《城镇建设行业标准》(CJ/T 149-2001)中,有液体培养基增菌法和滤膜法。 水质监测中微生物检测新技术 分子生物学技术——PCR方法 DNA模式图 水质监测中微生物检测新技术 分子生物学技术——PCR方法 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction , PCR)一种快速的特定DNA片段体外扩增法。特异地扩增所希望的目的基因或DNA片段,是获取目的DNA片段的一常规技术。 水质监测中微生物检测新技术 PCR方法 特点: 特异性强、灵敏度高、不依赖人为因素 ,可同时批量处理样品。 用途: 通过选用不同引物可准确鉴定隐孢子虫种属 ,可区分卵囊的死活 ,是目前该领域的研究热点。该试验根据C .parvum基因组序列 ,选用两对引物 ,利用巢式PCR特异性扩增隐孢子虫 1 8srRNA基因可变区 1 0 56bp和 435bp目标片段 ,从而检测隐孢子虫. 水质监测中微生物检测新技术 PCR方法 PCR的基本原理: 模板DNA 引物 4种脱氧核糖核苷酸 DNA聚合酶 水质监测中微生物检测新技术 PCR方法 PCR一般过程: 1、变性(denaturation): 加热使DNA双螺旋的氢键断裂,双链解离形成单链DNA。2、退火(annealling): 温度降低时使引物和其互补的模板在局部形成杂交链。3、延伸(extension) 水质监测中微生物检测新技术 PCR方法 水质监测中微生物检测新技术 酶免疫分析方法—— ELISA 酶与抗原或抗体相结合后,既不改变抗原或抗体的免疫学反应特性,也不影响酶本身的酶学活性,即在相应而合适的作用底物参与下,使基质水解而显色,或使供氢体由无色的还原型变为有色的氧化型。这种有色产物可用目测或光学显微镜和电子显微镜观察,也可用分光光度仪加以检测。 水质监测中微生物检测新技术 酶免疫分析方法—— ELISA 可以在细胞或亚细胞水平示踪抗原或抗体的所在部位,或在微克、甚至纳克水平上对其定量。 酶联免疫吸附试验在水质检测中的使用主要是微囊藻毒素检测中的应用。具有简单、快速、灵敏、低成本等优势,ELISA系统对MC LR的最低检测限度大约为3 0pg /ml. 谢谢! * ** * * 短棘盘星藻颗粒变种[Pediastrum boryanum var. granulatum (Kutz.) A. Br.] 形态特征:藻体呈齿盘形,由8个多边形细胞组成,其中外
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