脊髓背角C-纤维诱发电位LTP与神经病理性疼痛的关系及机制探讨-神经生理学专业论文.docx

脊髓背角C纤维诱发电位LTP与神经病理性 脊髓背角C纤维诱发电位LTP与神经病理性 疼痛的关系及机制探讨 专 业：生理学 博士生：项旭映 导 师：刘先国教授 摘 要 疼痛可以分为两大类：生理性疼痛和病理性疼痛。生理性疼痛，由伤害性刺 激所引起，是人体的报警系统，使机体免受伤害性刺激。病理性疼痛由强熟的伤 害性刺激或组织、神经损伤引起，表现为对伤害性刺激的反应增强(痛觉过敏)、 痛闽的下降(痛觉超敏)或自发性疼痛。病理性疼痛最显著的特征是在受损伤组 织修复之后疼痛往往仍然持续存在。由于病理性疼痛的机制尚不清楚，临床上尚 无恰当的治疗方法。研究病理性疼痛的机制，不但具有科学意义，而且具有重要 的临床意义。 长时程增强(Long-term potentiation，LTP)是指突触传递效率发生持续性的 增强。LTP首先发现于海马，并且被认为是学习与记忆的神经基础。u瞪也存在 于脊髓背角n 于脊髓背角n 1995年刘先国等首次发现刺激坐骨神经C一纤维引超脊髓背角C一 纤维诱发毫位王l曙。岁}翔瘸信号经出e一纾缝铸送至脊髓，遴髓与脊髓鹜焦棒经 元形成第一级突触。脊髓背角II板朦c～纤维诱发场电位的L1卞可能意味者脊 髓骜筵“瘫运忆”懿形戏。与病理惶疼瘫稳一襄敬蹩，錾断NMDA受俸、NKl 受体和NK2受体可防止脊髓背角C。纤维诱发电位的LTP。因此，脊髓背角C一 野维诱发场电位兹。瞪缀可髓是瘸疆健疼痛的夔要枫铡之一。健是，譬蘸淘玉 实验证据。 海马LTP的表达与突触结构的形态学变化密切檑关，但在脊髓背焦LTP的 产生是否引起突触结构豹形态学变化及其与痛觉避敏的关系尚不清楚。 因而我们选择行为学测试和电生理记录方法探讨脊髓背角l】板层C-纤维诱 发电位LTP与享串经病疆性疼痛的关祭；稻焉形态警方法骚究了在LTP诱导鞠维 持阶段脊髓背角II板层突触形态学变化。 1．诱导脊髓背角c一纤维诱发场电位LTP的强巍刺激可产生持 续戆病凳过敏 为了探讨脊髓背角c一纤维诱发场电位LTP岛痛觉过敏之间的关系，我们分 裂采用Von Frey hair佟为视械痛裁激，用Plantar lest作为熟刺激，测试动物的 痛行为庋j霞。结果发现：(1)强直刺激坐骨神经爝，大鼠刺激侧的后爪对14．5raN 的机械刺激的撤足百分率由刺激前的21±5．3％升高到82．9土8。O％e尸_O．01，n =7、；对53．5 mN裁激的撤足百分率由刺激前的33．2±5．1％升裔到88。694- 4．03％(|PO．01，n=7)。(2)强直刺激嫩骨神经后大鼠刺激侧的厢爪对辐射热刺激 的撤足潜伏期由刺激前的12．1±1．6s降低到8．4±O．5s‘尸O．05，舻7)。这种始常 的撤足潜伏期由刺激前的12．1±1．6s降低到8．4±O．5s‘尸O．05，舻7)。这种始常 豹痛孬为撩续约一溺。缀手术缍静6只太鬣，没有蕊察羁臻显懿痛行为学交纯。 同时，我们分别采用了电生理和行为学测试的方法，来研究NMDA受体在 LTP诱譬中巍异鬻臻行为麴诱导中懿痒鬟。续莱发瑷：(1)奁诱导l五P蓊40rain， 静脉或腹腔注射0．5mg／kg的MK一801对脊髓背角C·纤维诱发电位没有明簸影 噫，瞧霹辍JTLTP豹产垡。(2)强羹裁激前40min腹腔注射NMDA受体的辍凝 剂MK·801后(O．5mg,kg)能防止强髓刺激引起的痛觉过敏。 上述实验结果显示；诱导脊髓背角c一纤维诱发场电位L1P的强寅刺激W产 生持续的痛觉过敏。这一结果验证了我们的设想，即c一纤维诱发电位L1睁怒产 生痛觉过敏的机制之～；LTP的诱好和异常痛彳亍为的诱导都依赖于NMDA受体 的激活。 2．脊髓背螽ll教层LTP诱导及维持过程孛麓突皴形态学及诗爨 学变化 兔了攘讨脊髓鹜角LTP诱导发缭持过程串的突皴交纯，我靛分裂对LTP诱 导后30rain，3h和5h的脊髓背角进行了形态学研究。结果发现：(1)在LTP形 成后30min，II板层内的突触屠致密物质(PsD)增厚，突触间隙增宽；(2)在 LTP形成厢3h，PSD厚度、突触间隙宽度及突触界面曲率都柱明显增加，总突 触的数密度比对照组衡明显增高。(3)在u曙形成后3h和5h，穿孔性突触的 数密度与对照组比较，有明显增离。上述磅究结袋显示：PSD增簿是u潆诱导 阶段的主露形态学变化。突触界面臌i率增大及穿孔突触数目增多是【胛维持阶 段豹主螫形态学基毯。 3．KN-93鼹脊夔稽角ll援鬃LTP诱鼍爱攀麓维持过糕孛懿突触形态学殿计越学变优的澎响 3．KN-93鼹脊夔稽角ll援鬃LTP诱鼍爱攀麓维持过糕孛懿突触 形态学殿计越学变优的澎响 为了豢谗锻～键谲缀鑫靛羧戆爨巍激懿II(CaMrd0毪鸯懿赣霸LTPqa戆撵 丽，我稻艨用CaMK．II的逸泽性探案l黎JKN-93，程L