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课题1 微生物的实验室培养;微生物包括哪五类:;细菌的外形与大小;细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌(纤)毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质,细胞质中又有液泡、储存性颗粒、核质等。;*细胞壁;芽孢;菌落:;菌落;放线菌;链霉素、土霉素、四环素、
氯霉素、红霉素、庆大霉素 ;病毒的结构;病毒;SARS病毒、 禽流感病毒;朊病毒(蛋白质病毒);2、病毒的增殖:;真菌;;生殖;细菌的营养类型 ;;1.何为培养基?;一、基础知识:; 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 (参考教材附录内容);培养基;液体培养基;固体培养基:菌落,菌苔;半固体培养基;4.培养基的用途;1.何为无菌技术?无菌技术包括哪些方面?;1.无菌技术的概念 ; (1)消毒定义:
利用化学或物理方法,杀死大部份致病微生物的过程。区分为高程度消毒(High-level Disinfection)、中程度消毒(Intermediate-level Disinfection)、??程度消毒(Low-level Disinfection)三种方式。; (2)灭菌的定义:;① 煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
② 巴氏消毒法:70~75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min
③ 化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;用氯气消毒水源等
④ 紫外线消毒;①灼烧灭菌
②干热灭菌:160~170 ℃下加热1~2h。
③高压蒸气灭菌:100kPa、121 ℃下维持15~30min.; 最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌,它可以杀灭所有的生物,包括最耐热的某些微生物的休眠体,同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。
有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌,特别是空气中的杂菌污染,试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口,通常采用棉花塞,也可采用各种金属、塑料及硅胶帽,它们只可让空气通过,而空气中的其他微生物不能通过。
而平皿是由正反两平面板互扣而成,这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。 ;分类;1.关于微生物营养物质的叙述中,正确的是
A、是碳源的物质不可能同时是氮源
B、凡碳源都提供能量
C、除水以外的无机物只提供无机盐
D、无机氮源也能提供能量;2.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是
A、防止杂菌污染
B、消灭杂菌
C、培养基和发酵设备都必须灭菌
D、灭菌必须在接种前;编号;(3)若除去成分②,加(CH2O),
该培养基可用于培养 。
(4)表中营养成分共有 类。
(5)不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前,要进行是 。
(6)右表中各成分重量确定的原则是 。
(7)若右表培养基用于菌种鉴定,应该增加的成分是 。;1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?;3.微生物实验室培养的基本操作程序;四、实验操作;1.计算、称量
2.溶化
3.调pH: pH7.6
4.过滤:这一步可以省去。
5.分装:分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
6.加塞
7.包扎;8.灭菌:
将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。将培养皿用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170 ℃下灭菌2h。;倒平板技术;倒平板技术;倒平板技术;倒平板技术; 9.倒平板:
待培养基冷却到50 ℃左右时,在酒精灯附近倒平板。(倒平板操??见课本)2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种.
10.无菌检查:
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。; 1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?; 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?;3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?; 4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?;(二)纯化大肠杆菌;平板划线的操作方法;;;;;;;;;;; 一旦划破,会造成划线不均匀,难以达到分离单菌落的目的;
二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落,菌落会沿着划破处生长,会形成一个条状的
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