活性氧引起的神经细胞凋亡及一种新型抗氧化剂对其保护作用的分子机理分析-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

中国协和医科大学硕士学位论文中英文缩略词 中国协和医科大学硕士学位论文 中英文缩略词 AD Alzheimer’S Disease 阿尔茨海默氏病 AP Ammonium Persulfate 过硫酸胺 APP 13一Amyloid peptide precursor 13一淀粉样肽前体蛋白 AB 13一Panyloid 6一淀粉样肽 CNS Central Nervous System 中枢神经系统 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 DNA Deoxyribonucleic Acid 脱氧核糖核酸 DTT Dithiothreitol 二硫苏糖醇 EDTA Ethylene Diamine Tetraacetic 乙二胺四乙酸 Acid FcM Flow Cytometry 流式细胞计量术 FITC Fluorescein Isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 HRP Horseradi sh peroxidase 辣根过氧化物酶 IL-6 Interleukin一6 白细胞介素一6 MTT 3一(4，5一dimethylthiazol一2一y1) 噻唑蓝 一2， 5一diphenyltetraz01ium bromide NF—K B Nuclear factor K B 核因子K B NFT Neurofibrillary tangle 神经纤维缠结 PBS Phosphate buffer solut ion 磷酸缓冲液 PI Propidium iodide 碘化丙啶 PMSF Phenylmethylsulfonyl Fluoride 苯甲基磺酰氟 PS Phosphatidylserine 磷脂酰丝氨酸 PTP Permeability transition pore 通透改变孔 Rhl23 Rhodamine 123 罗丹明123 RoS Reactive oxidative species 活性氧 Rpm Rotation per minute 每分钟转速 △1lr． Mi tochondrial transmembrane 线粒体膜电位 Potential SDS sodium Dodecylsulfate 十二烷基磺酸钠 SDS—PAGE SDS—Polyacrylamide SDS聚丙烯酰胺凝 Electrophores i S 胶电泳 SP Seni le Plaque 老年斑 TEMED N，N，N，N-Tetmmethyl Ethylene N’NN，N-四甲爱乏擞 Diamine lrl S Tri(hydroxymethyl)aminomethane三羟甲基氨基甲烷 中国枷和医科大学硕士学位论文中文摘要 中国枷和医科大学硕士学位论文 中文摘要 老年性痴呆(亦称阿尔茨海默病，Alzheimer’S Disease，简称AD)是发生 在老年期及老年前期以慢性进行性记忆功能障碍为特征的神经系统退化性病变 ， “1，该病发病机制复杂，是一种多病因的疾病。《目前有关AD发病机制的假说有： 1、淀粉样蛋白(AB)形成和作用假说；2、tau蛋白异常变化的神经元纤维变 性假说；3、凋亡假说；4、自由基损伤假说；5、细胞周期假说等。 近年来研究发现氧化损伤在退行性神经系统疾病中具有重要作用M。由APP 酶解产生的A B可产生活性氧(Reactive Oxygen Species，ROS)“’5’“”，而A B沉 积又是老年痴呆的特征的病理学表现之一。所以活性氧和老年性痴呆的关系成为 研究热点。本论文重点研究和探讨活性氧引起神经细胞凋亡及本组发现的强抗氧 化剂麦芽酚(maltoI)对自由基引起的神经细胞凋亡的保护作用的分子机理研究。 【本研究采用过氧化氢(H202)为活性氧的来源，以人神经瘤细胞(SH—SY5Y) 为研究对象，证实了活性氧可诱导SH．SY5Y细胞凋亡；因本实验室前期工作发 现麦芽酚具用良好的防治拟痴呆小鼠模型作用，所以本论文在细胞和分子水平做 进一步的研究。研究中用麦芽酚保护SH．SY5Y细胞后，再用过氧化氢诱导，发 现麦芽酚可以有效的保护SH．SY5Y细胞的氧化损伤及细胞凋亡。本论文将探讨 活性氧引起的细胞凋亡及麦芽酚(已申报专利，专利号6)抑凋亡作 用的可能的分子机制。 在确定了H202可VA61起SH．SY5Y细胞凋亡后，本文重点研究麦芽酚作为抗 氧化剂保护神经细胞凋亡的机理。研究中采用了组织化学及形态学观察细胞学的 变化、pI和Annexin V双染的流式细胞仪分析早期凋亡的细胞、提取DNA分析 DNA片段化的形成、罗丹明．123和P1双染法分析线粒体功能的变化、Western 印迹法分析了APP、IL一6和NF—K B蛋白的表达