复合前列腺特异性抗原的单克隆抗体制备及化学发光-中国免疫学杂志.PDF

詹炉停等摇 复合前列腺特异性抗原的单克隆抗体制备及化学发光法免疫定量检测试剂研究摇 第8期 ·1171· doi:10.3969/ j.issn.1000鄄484X.2016.08.019 复合前列腺特异性抗原的单克隆抗体制备及化学发光法免疫定量检测 试剂研究淤 于 于 盂 于 盂 盂 于 于 詹炉停摇 温桂平摇 赵摇 敏 摇 依摇 含 摇 刘江武 摇 郭小怡 摇 林海军 摇 黄刘女 摇 夏宁邵 摇 郑子峥 (厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,公共 卫生学院,厦门 361102) 摇 摇 中图分类号摇 R392郾33摇 摇 文献标志码摇 A摇 摇 文章编号摇 1000鄄484X(2016)08鄄1171鄄05 [摘摇 要]摇 目的:获得特异性检测复合前列腺特异性抗原(c鄄PSA)的单克隆抗体配对,建立基于化学发光c鄄PSA免疫定 量试剂。方法:利用市购c鄄PSA抗原免疫6周龄雌性BALB/ c小鼠,间接法ELISA差异筛选抗c鄄PSA、游离前列腺特异性抗原 (f鄄PSA)、总前列腺特异型抗原(t鄄PSA)的抗体,抗体配对后化学发光定量检测血清中c鄄PSA蛋白。结果:获得抗体配对 1A10/ 7D6鄄SAE,经c鄄PSA标准品及临床血清样本初步筛选,该抗体配对适用于基于化学法发光的免疫反应定量检测试剂的开发;血 清阳性样本与阴性样本检测结果显示具有统计学意义(P0郾000 1);阳性样本定量结果与Siemens公司复合前列腺特异性抗 原测定试剂盒(直接化学发光法)的相关系数为0郾97;线性范围为0郾1~100 ng/ ml;检测灵敏度为0郾005 ng/ ml。结论:成功筛 选获得特异性检测c鄄PSA 的抗体配对,并开发c鄄PSA化学发光免疫定量试剂,其检测能力与国际主流试剂相当。 [关键词]摇 复合前列腺特异性抗原;单克隆抗体;化学发光;定量试剂 Generation of monoclonal antibodies against complexed prostate specific antigen and development of an antibody鄄based chemiluminescence immune quantifica鄄 tion assay ZHAN Lu鄄Ting,WEN Gui鄄Ping,ZHAO Min,YI Han,LIUJiang鄄Wu,GUO Xiao鄄Yi,LIN Hai鄄Jun,HUANG Liu鄄N俟, XIA Ning鄄Shao,ZHENGZi鄄Zheng郾StateKey Laboratory of Molecular Vaccinology andMolecularDiagnostics,School of Public Health,NationalInstituteof Diagnostics and VaccineDevelopmentof InfectiousDiseases,Xiamen University, Xiamen361102,China [Abstract]摇 Objective:To construct a chemiluminescense immune quantification assay based one paired mAbs against complexed prostate specificantigen(c鄄PSA)郾Methods:Sixweek鄄oldfemaleBALB/ cmicewereimmunizedwiththecommercialc鄄PSA antigen郾After serum titer reaching a platform stage,the spleen was immunized and fused with mouse myeloma cell lines(Sp2/ 0)郾The hybridoma were screenedby indirectELISA,andeightgeneratedantibodieswerepairedtoobtainaquantitativeanalysisofthechemical luminescence郾Results:7D6 speci