快速高效植物瞬时表达的试验室烟草无土栽培体系-南方医科大学学报.PDF

·772 · 南方医科大学学报（J South Med Univ ） 2012;32(6) 基础研究 快速高效植物瞬时表达的实验室烟草无土栽培体系的构建 1 1 2 1 2 3 4 3 1 莫倩珍 ，麦荣嘉 ，杨志晓 ，陈敏芳 ，杨铁钊 ，赖华芳 ，杨培梁 ，陈 强 ，周晓红 1 4 2 南方医科大学 公共卫生与热带医学学院病原生物学系，南方医院实验动物研究中心，广东 广州 510515 ；河 3 南农业大学烟草学院，河南 郑州 450002 ；Biodesign Institute and College of Innovation, Arizona State University, Tempe, AZ85287 USA 摘要：目的 构建适用于快速高效植物瞬时表达系统的实验室烟草无土栽培体系。方法优化烟草的无土栽培条件，基于 Geminivirus新型植物高效瞬时表达系统，观察烟草品种、侵染时机、侵染工程菌浓度、侵染后叶片采收时间对无土栽培烟草表达 绿色荧光蛋白（GFP）的影响，以Western blot 和ELISA 分析GFP 表达情况。结果烟草无土培育的最佳条件为：光照强度 9000LX/层，光照时间16 h/d ，日/夜温度28/21 ℃，相对湿度80%。侵染工程菌的最佳D600 为0.8；叶片采收最佳时间为侵染后4 d ； 本明烟和豫烟5 号最佳侵染时机分别为第6 周和第5周；工程菌pBYGFPDsRed.R/LBA4404 侵染的本明烟和豫烟5 号均能高效 表达GFP ；豫烟5号的平均生物量高于本明烟。结论基于人工气候箱成功构建了实验室烟草无土栽培体系，并可实现GFP 在本 明烟和豫烟5号的快速高效表达。 关键词：烟草；瞬时表达；无土栽培；绿色荧光蛋白 中图分类号：Q78 文献标志码：A 文章编号：1673-4254（2012）06-0772-06 doi: 10.3969/j.issn. 1673-4254.2012.06.004 /kcms/detail/44.1627.R1752.015.html A hydroponic cultivation system for rapid high-yield transient protein expressioin in Nicotiana plants under laboratory conditions 1 1 2 1 2 3 4 3 MO Qianzhen , MAI Rongjia , YANG Zhixiao , CHEN Minfang , YANG Tiezhao , LAI Huafang , YANG Peiliang , CHEN Qiang , ZHOU Xiaohong1 1School of Public Health and Tropical Medicine, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China; 2 College of Tobacco Science, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China; 3Biodesign Institute and College of Innovation, Arizona State University, Tempe, AZ852