酶工程研究的新进展.pptVIP

王逸云 题目背景 酶工程研究的新进展 化学酶工程 自然酶的开发 自然酶的开发 酶的化学修饰 酶的化学修饰方法 酶的化学修饰方法 酶的化学修饰 酶的固定化 酶固定化的进展 酶的固定化 人工合成酶的研制 人工合成酶的研究热点 人工合成酶的研究热点 酶基因的克隆和表达 酶基因的克隆和表达 酶的遗传修饰 CONTENTS 酶的遗传设计 酶工程研究的新进展 近年来，酶工程的基础研究和产业应用发展非常迅速，正在或即将改变人们的生活和生产方式。工业用酶日益广泛地应用于化学、医药、纺织、农业、日化、食品、能源、化妆品及环保等行业。由于蛋白质工程、基因工程和计算机信息等技术的发展，使酶工程技术得到了迅速发展和应用，各种新成果、新技术、新发明不断涌现。 化学酶工程 生物酶工程 化学酶工程 自然酶的开发 酶的化学修饰 酶的固定化 人工合成酶的研制 据估计自然界中存在有7000多种自然酶，目前已经发现和鉴定的约有3000余种，小批量生产的商品酶有几百种。大规模生产的有几十种。目前已应用于工业生产的主要是：水解酶、凝乳酶、果胶酶、糖苷酶、氧化酶、转移及异构酶等。当前与生产密切相关酶的研究备受关注，主要有以下几个方面。 糖生物工业 能源工业 目前研究的热点是功能性低聚糖的开发，而在此领域内各种低聚糖水解生产酶的开发成为关键因素，如催化水解菊粉生产果糖的菊粉酶的研究备受关注。 由于纤维素类可再生资源的广阔利用前景而导致对纤维素酶、漆酶和木质素酶的大规模研究，已开发出了里氏木霉、白腐真菌等优良的产酶菌株。 饲料工业 药用酶、抗体酶和酶标药物的研究开发及新型的溶栓酶、艾滋病毒蛋白酶等的研究备受关注。另外位于真核细胞染色体末端由重复DNA序列和蛋白质组成的端粒与细胞的寿命和癌变有密切关系，端粒酶在端粒中起着重要的催化作用，有关端粒的结构和端粒酶的催化机制的研究已经成为自然酶的研究热点之一。 医药工业 有广阔应用前景，能水解植酸的磷酸酶类是此领域的研究热点，特别是植酸酶，其作为一种新型的动物饲料添加剂用酶制剂对提高饲料中磷的利用率和减小环境污染有着重大意义。最近的研究主要集中在高酶源、高热稳定性的菌株筛选方面。 目前，自然酶开发的宝藏是极端环境微生物和不可培养微生物。在极端环境下存在许多嗜极菌，具有特殊的生理功能。这些微生物的代谢过程和特殊的生物学功能是由极端条件下的酶和蛋白质的功能所决定的。从这些极端微生物中分离出来的酶显示了独特的特性，具有极高的耐热、耐酸、耐碱、耐盐、耐有机溶剂及耐表面活性剂性能，其催化性能优于目前在工业生产中的各种酶，因此可将这些酶作为设计和构造工业上具有特性蛋白质模型而加以应用。 酶的化学修饰是指利用化学手段将某些化学物 质或基团结合到酶分子上，或将酶分子的某部分删 除或置换，改变酶的理化性质，最终达到改变酶的 催化性质的目的。随着基因工程、分子生物学、蛋 白质工程、有机合成等技术的发展，酶的大分子物 质化学修饰也发展起来，并且在修饰剂的选用和修 饰方法上有较大进展。酶的化学修饰主要方法有以 下几种。 修饰酶的功能基团。如氨基、羟基、咪唑基等可离解基团。由此发展起来的酰化法、烷基化法、丹磺酰氯法等。 酶分子内或分子间交联。应用某些双功能试剂分子两端的功能基团如醛基等可使酶分子内或分子间肽链的两个游离氨基分别发生交联，主要有右旋糖苷溴化氰法、羰二亚胺法、戊二醛法等。 酶与高分子化合物结合。主要有聚乙烯醇法、聚顺丁烯二酸酐法等。酶与高分子化合物结合后，可以增加酶的稳定性。常用修饰剂主要有乙酸酐、氮芥类、磷氧酰氯、环氧丙烷、重氮盐类、羟胺等，其中连四硫酸钠和钾作为一种温和的氧化修饰剂，吸引了大量学者对连四硫酸盐类修饰剂的研究。 化学合成和化工过程几乎都在有机溶剂中进 行，而有机溶剂往往被认为会引起酶的失活，但利 用化学修饰技术改造酶，就能催化有机相中的反 应。对此，人们展开了大量研究，已涉及到众多类 型的反应。特别是在对映体选择降解、非对映体裂解和手性化合物的合成与拆分方面，化学修饰酶显示了巨大的威力。酶的有机合成在生产上的作用越来越突出，正成为酶工程领域内的一个热点。 近年来，细胞固定化技术、固定化多酶技术及 反应器、固定化微生物多酶反应系统、固定化酶 微生物复合物等技术相继发展起来，而酶的固定化 是这一发展的基础。以往报道酶的固定化方法有几 百种，切实可行的主要吸附法、包埋法、交联法、 微胶囊法等。酶固定化的进展主要体现在以下几个 方面。 新载体如纤维素、淀粉、黄原胶、几丁质、海藻酸