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自噬检测方法 常用细胞器标记物 自噬体检测: 1.透射电镜 2.免疫荧光观察LC3斑点,(P62辅助说明); 3.WB检测LC3+P62,并增加自噬降解抑制剂处理组。 实验顺序:3 1 自噬流评价: 1.双标LC3,红色斑点/黄色斑点; 2.LC3与lamp1的共定位; 3.DQ-BSA; 4.稳转GFP-LC3细胞中检测游离GFP Fusion of autophagosomes with endosomes/lysosomes is mediated by the class C VPS complex, Rab GTPase and the SNARE complex. Cai, H., Reinisch, K. Ferro-Novick, S. Coats, tethers, Rabs, and SNAREs work together to mediate the intracellular destination of a transport vesicle. Dev. Cell 12,671–682 (2007). Itakura, E., Kishi-Itakura, C. Mizushima, N. The hairpin-type tail-anchored SNARE syntaxin 17 targets to autophagosomes for fusion with endosomes/lysosomes. Cell 151, 1256–1269 (2012).Takáts, S. et al. Autophagosomal Syntaxin17-dependent lysosomal degradation maintains neuronal function in Drosophila. J. Cell Biol. 201, 531–539 (2013) 机制研究: CO-IP 比较各组处理后stx17结合的SNAP29和vamp8 * * * *
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