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生物学综合实验模块二 植物生理学大实验 原理 测定时所发生的一系列反应如下： 2NaOH + CuSO4 → Na2SO4 + Cu (OH)2 Cu (OH)2 + 酒石酸钾钠 → 二价铜离子络合物+ H2O 还原糖 + 二价铜离子络合物 → 糖酸 + Cu2O KIO3 + 5KI +3H2SO4 → 3I2 + 3K2SO4 + 3H2O Cu2O + H2SO4 → Cu2SO4+H2O Cu2SO4 + I2 + K2SO4 → 2CuSO4 + 2KI 2Na2S2O3+I2 → 2NaI + Na2S4O6 材料及设备 一、材料 苹果。取若干苹果切开切碎，随机取材，2克/份，共3份。 二、仪器 大试管（25×250毫米） 吸量管 棕色试剂瓶 锥形瓶 玻璃搅棒 水浴锅 回流装置 50毫升酸式滴定管 容量瓶 细口试剂瓶 烧杯 恒温水浴 分析天平 试剂 碱性铜试剂的配制 称酒石酸钾钠6克，溶于约50毫升蒸馏水中；称无水 碳酸钠10克，研成细粉，溶于约100毫升热蒸馏水中；称 取碳酸氢钠12.5克，溶于约100毫升水中，可加热促进溶 解。待全部溶解后，将上述三种溶液混合均匀。另外称 取结晶硫酸铜（CuSO4·5H2O）3.25克，研成细粉，溶于 约50毫升蒸馏水中。完全溶解后，在搅拌下将它加入上 述混合液中。为防止沉淀可在沸水浴上加热10分钟。称 取碘酸钾（KIO3）0.4克（要准确到0.01克），草酸钾9 克，溶于约100毫升蒸馏水中，完全溶解后，加入到上述 混合液中，定容到500毫升。 实验步骤 一、标定硫代硫酸钠溶液的浓度 取三个100毫升锥形瓶，各加入10毫升蒸馏水和0.1克碘化钾 （KI）。用移液管准确吸取10毫升0.0050N重铬酸钾溶液和1毫升8N 的盐酸，此时反应如下： K2Cr2O7 + 6KI + 14HCl → 8KCl + 2CrCl3 + 7H2O + 3I2 当碘化钾完全溶解后，立刻用待标定的硫代硫酸钠溶液进行滴 定，此时需不时摇动锥形瓶。当溶液滴至微黄色时，加入1-2滴1% 淀粉溶液，继续滴定，至蓝色突然消失。记录下硫代硫酸钠的用 量。三次滴定值相差不得超过0.1毫升，求出平均值。该溶液应每周 标定一次。 实验步骤 二、绘制葡萄糖的标准曲线 用吸量管准确吸取标准葡萄糖母液（10毫克/5毫升），分别配制成每5毫升 含糖0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0毫克的溶液，用50毫升容量瓶配制。 用吸量管准确吸取各种浓度的糖溶液5毫升（每种浓度做三份），放到大试 管内。取另一支吸量管，准确吸取5毫升碱性铜试剂，放到大试管内，空白用5 毫升蒸馏水代替糖溶液。混匀后，在沸水浴中加热15分钟，然后取出在冷水中 放3分钟，加热和冷却时，切勿摇动。 冷动后，用滴管沿壁加约1毫升5%碘化钾溶液（约20滴），再加入1毫升 6N的硫酸，并摇动试管，待反应停止后，立刻用标定好浓度的硫代硫酸钠溶液 滴定，边滴边用特制的玻棒搅动。当溶液褪至淡黄色时，加入2-3滴1%淀粉溶 液，使溶液呈蓝色。继续滴定，至蓝色突色消失，并在半分钟内不再变蓝。 记录硫代硫酸钠的用量。三次滴定的差值，不得超过0.1毫升。以空白滴定 值和糖溶液滴定值之差为纵坐标，葡萄糖浓度为横坐标，绘成标准曲线。 实验步骤 三、检查标准曲线 另取一种未知浓度的葡萄糖溶液，按上述操作程序二 进行测定，从绘制的标准曲线上查出糖的含量，并与实 际值比较，求出百分误差。此微量定糖法的准确度，所 测葡萄糖若在0.3-3毫克范围内，可允许的绝对误差为 ±0.01毫克，百分误差（相对误差）为±2%。从测得值 与实际值比较，求出百分误差： 绝对误差×100 百分误差（±%）= －－－－－－－－ 实际值 实验步骤 四、植物材料的分析 随机取3份苹果，2克/份，每份用滤纸包好，分别放入100毫升 的锥形瓶中。向每瓶内各加入20毫升80%乙醇溶液，塞上回流管， 在80℃恒温水浴上回流提取30分钟。仔细吸出上清液，分别过滤到 50毫