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- 2019-04-28 发布于广东
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在生物个体发育的不同阶段,或是在不同的组织或细胞中发生的不同基因,按时间、空间进行有序的表达方式,称为基因的差异表达。 真核基因总数约为100 000个,但在一定的发育阶段、在某一类型细胞当中,则只有15%左右的基因得以表达,产生出大约15 000种不同的mRNA分子。 DDRT-PCR:基于PCR的mRNA差异显示技术 第四节 基因差异表达获得目的基因 差异显示PCR(DDRT-PCR) (1)3’ 锚定引物 Oligo(dTMN):Oligo(dT)引物的3’端加两个核苷酸(倒数第二个不再是T)。 AAAAAAAAAAAAAAAA mRNA 3’ 5’ NM TTTTTTTT M:A、G or C N: A、G、T or C 5’ 3’ 利用mRNA的poly A尾巴设计 利用两组特殊的引物对差别表达的基因进行扩增 12种锚定引物 AG TTTTTTTT 5’ 3’ CG TTTTTTTT 5’ 3’ GG TTTTTTTT 5’ 3’ TG TTTTTTTT 5’ 3’ AA TTTTTTTT 5’ 3’ CA TTTTTTTT 5’ 3’ GA TTTTTTTT 5’ 3’ TA TTTTTTTT 5’ 3’ AC TTTTTTTT 5’ 3’ CC T
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