课件：第七章化学毒物的生殖毒性食品毒理学.ppt

4、胎仔检查 自然分娩前1-2日将受孕动物处死，剖腹取出子宫及活产胎仔，并另行记录死胎及吸收胎。一般大鼠在受孕后第19-20天，小鼠第18-19天，家兔在第29天。 下列几方面进行畸形检查： 外观畸形肉眼检查，例如露脑； 肉眼检查内脏及软组织畸形，例如腭裂； 骨骼畸形检查，例如颅顶骨缺损，分叉肋等。畸形检查只限活产胎仔。 五、外源化学物发育毒性的评价 5、数据处理 活产幼仔平均畸形出现数:即根据出现的畸形总数，计算每个活产幼仔出现的畸形平均数。 畸形出现率:即作为畸胎的幼仔在活产幼仔总数中所占的百分率。 母体畸胎出现率 :即出现畸形胎仔的母体在妊娠母体总数中所占的百分率 6、 结果评定 致畸指数越大，致畸作用越强，反之越小。一般认为致畸指数10以下为不致畸，10－100为致畸，100以上为强致畸。 母体毒性与发育毒性比值，即母体最低损害作用剂量（A)与胎仔最低损害作用剂量（D)之比，比值越大，危险性越高。 五、外源化学物发育毒性的评价 7、致畸物以及发育毒性作用物危害度评价 欧共体（EEC）和经济合作与发展组织（OECD）建议的致畸物分级标准。主要根据动物试验和人群调查资料，具体分级标准： 1级，已确定人类母体接触后可引起子代先天性缺陷； 2A级，对动物肯定致畸，但对人类致畸作用尚未确定因果关系； 2B级，动物试验结果肯定致畸，但无人类致畸资料； 3 级，尚无结论性肯定致畸证据或资料不足； 4级，动物试验阴性，人群中调查结果未发现致畸 五、外源化学物发育毒性的评价 确定受试物是否具有致畸作用时需注意以下几点： 任何结果必须通过统计计算方法进行剂量组与对照组对比；必须具有统计学意义才能认为是阳性结果。 应该掌握所用实验动物品系的自然畸形发生率。 致畸作用中动物物种和品系差异较为显著，因此要求在两种动物进行试验。由于物种差异，对动物不具有致畸作用的外源化学物对人是否致畸的问题，应格外认真对待。 发育毒性的替代试验 大鼠全胚胎培养 胚胎细胞微团培养 小鼠胚胎干细胞试验 发育毒性的体内预筛试验(C .K.试验) 第四节 繁殖试验 外源化学物对生殖过程作用的评定主要通过生殖毒性试验来进行，也称为繁殖试验。 生殖毒性试验可以全面反映外源化学物对性腺功能、发情周期、交配行为、受孕、妊娠过程、分娩、授乳以及幼仔断乳后生长发育可能发生的影响。 评定的主要依据是交配后母体受孕情况（受孕率）、妊娠过程情况（正常妊娠率）、子代动物分娩出生情况（出生存活率）、授乳哺育（哺育成活率）以及断奶后发育情况等。 试验方法原则 受试动物：性成熟大鼠、小鼠或家兔 剂量分组:一般设立三个剂量组（至少两个剂量组）和一个对照组 染毒途径:动物接触受试物的方法应参照人类实际接触途径 动物数:每组雌雄各16到20只，或雌16到20只，雄8到10只 第四节 繁殖试验 试验方法 : 三代两窝 第四节 繁殖试验 F３b F３a F１b F２b F２a F１a F０ （断奶或出生８周） 给予受试物８到１２周 第一次交配 第二次交配 观察三个月，喂饲普通饲料，观察其生长发育情况 断乳后给予受试物８到１２周 观察三个月，喂饲普通饲料，观察其生长发育情况 断乳后给予受试物８到１２周 两代一窝(和一代一窝)生殖试验 F２断奶，检查发育情况 F２出生，每窝留８只幼仔 F１交配 断奶，给予受试物 F１（每窝选留幼仔８只，雌雄各半） 第１６~１９周　雌雄交配 出生第８周给予受试物（F０） 第四节 繁殖试验 观察指标： 受孕率（％）:反映雌性动物生育能力以及雌性动物受孕情况 正常分娩率（％）:反映雌性动物妊娠过程是否受到影响； 幼仔出生存活率（％）:反映雌性动物分娩过程是否正常； 幼仔哺育成活率（％）:反映雌性动物授乳哺育幼仔的能力； 除上述４个指标外,还应该注意出生幼仔是否有畸形存在，对死亡的幼仔应进行畸形检查，可为下一步致畸试验提供参考。 第四节 繁殖试验 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 可编辑 可编辑 第一节 雄性生殖毒性 第二节 雌性生殖毒性 第三节 致畸试验 第四节 繁殖试验 第七章　化学毒物的生殖毒性 第一节 雄性生殖毒性 一、 精子子的生成过程 精原细胞→初级精母细胞→次级精母细胞→精子细胞→精子 二、毒物对雄性生殖影响 1、对睾丸生精细胞的影响； 2、对内分泌功能的影响； 3、对性功能和生殖功能的影响。 三、雄性生殖毒性的检测方法 1、精子生成分析 ①精子计数；②精子形态观测； ③精子 状态分析试验 2、精子穿透试验 判