细菌的革兰氏染色及染色液的配制.docxVIP

-- -- 革兰氏染色的一般步骤 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法， 1884 年由丹麦医师 Gram 创立。 未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察。染色后细菌 与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴 定。 革兰氏染色属复染法，即将标本固定后，先用结晶紫染色  1 分钟后水洗，然后加革兰碘 液媒染一分钟后用酒精脱色，再用稀释石炭酸复红复染。染色后除可以看到细菌形态外，还 可将细菌分为两大类，即不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（ G＋ ）。被酒精脱色复 染成红色者为革兰氏阴性菌（ Gˉ）。 革兰氏染色原理尚不肯定，可能与细菌所带核糖核酸、细菌壁结构通透性、等电点等因 素有关。致病菌如 金黄色葡萄球菌、绿色溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、炭疽杆菌 等 属革兰氏染色 阳性菌 。 百日咳杆菌、大肠杆菌（大肠埃希菌）、铜绿假单胞菌、伤寒杆菌、 痢疾杆菌、霍乱弧菌、沙门菌、流行性脑膜炎双球菌、淋病双球菌 等均属革兰氏 阴性菌 。所 以根据细菌的革兰氏染色性质，可以缩小鉴定范围，有利于进一步分离鉴定，以对疾病做出诊断。又由于各种抗生素的抗菌谱不同，革兰氏染色尚可做为选用抗生素的参考。 革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是： 1）涂片固定。 2）草酸铵结晶紫染 1 分