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光动力疗法原理；鲜红斑痣的病理 解放军总医院激光医学科 顾瑛 光动力疗法机理 　　光动力疗法（Photodynamic therapy，PDT）的作用机理包括了三个层次，首先是光敏剂吸收光后产生光毒性物质，其次是这些毒性物质破坏生物大分子，最后导致细胞和组织的破坏，产生生物学效应。分述如下： 　　在光动力过程中，光敏剂分子发生能级的变化基态光敏剂吸收光子的能量后，经单重态（寿命1～1000 ns）系间窜越到三重态（寿命1～1000 μs），三重态敏化剂可进行以下两种形式的反应[1]： 　　①经过氢原子或电子转移，直接同底物或溶剂反应，形成自由基或自由基离子，此型反应叫类型Ⅰ（TypeⅠ）反应； 　　②将能量转移给分子氧，形成单线态氧，单线态氧是高活性的氧化剂，可使底物被氧化，此型反应叫类型Ⅱ（TypeⅡ）反应。 　　Ⅱ型反应的产物统称活性氧（Reactive oxygen species，ROS）， HYPERLINK /cme/html/cme_K3000009/1701/index.html?deptno=K3000009subno=17artno=1 \l # \o 是氧的某些代谢产物和一些反应的含氧产物。 活性氧除了单线态氧、超氧阴离子、羟自由基、过氧化氢外，还包括脂质过氧化的中间产物LO·、LOO·和LOOH·。也有人还把臭氧O3和几种氮的氧化物包括在内[2]。 图1 光敏化作用的两种类型 　　ROS与生物大分子的作用 　　可被ROS破坏的生物分子，包括某些有机酸、醇、胺、碳水化合物、含氮杂环分子、核酸和某些核酸碱基，一些植物激素、蛋白和某些氨基酸，吡咯、胆固醇、不饱和类脂、某些维生素等。 　　单糖，多糖如纤维素，复糖如肝素和透明质酸，都可以被ROS氧化。 　　脂类如脂肪酸、脂肪、磷脂、类固醇及其衍生物，不饱和脂肪酸及含不饱和脂肪酸的脂肪和磷脂等在光动力过程中被破坏，形成复杂的产物。 　　在大致20个氨基酸中仅有五个可以在光敏剂存在下被快速光氧化，它们是含硫醇的半胱氨酸、含咪唑基的组氨酸、含硫醚键的蛋氨酸、含吲哚的色氨酸和含酚的酪氨酸。这些氨基酸都含富电子的侧链。 　　有100多种蛋白都可以被光敏氧化。蛋白分子的作用点一般是上述提到的五种氨基酸残基，处在蛋白分子表面的敏感的残基被氧化的速度比埋在蛋白内部的要快得多。如果蛋白是非折叠的，所有的敏感残基都可被氧化。大多数情况下肽链在光动力反应后并不断裂。经光动力过程处理的蛋白的物理化学性质会发生很大的变化，如吸收光谱、聚集性质、金属同蛋白结合的性质、构象、光学活性、溶解性、粘度等。它们正常的生物功能都会变化或遭破坏，如几乎所有的酶都可以失去他们的生物催化性质；有的蛋白的抗原性以及它们同抗体反应的能力降低；一些肽荷尔蒙如血管紧张素，胰高血糖素，胰岛素受到光动力作用时，生物功能被破坏，来自细菌、植物和蛇的毒性蛋白也会失去活性。 　　对嘌呤和嘧啶、核苷和核苷酸、以及一些有关化合物进行过研究。在生理条件下，嘌呤比嘧啶更容易被光敏氧化，鸟嘌呤和它的衍生物比其他嘌呤更敏感。DNA的单股链会断裂，除了链断裂，还会引起构象的变化、光谱位移、溶液黏度降低、易被酶分解等生物活性发生变化，进而核酸翻译活性被改变。 　　除了上述生物分子以外，还有些生物分子对光动力攻击也是敏感的。如维生素C在光敏剂卟啉的作用下可发生光氧化，形成自由基。鲨烯形成过氧化物，另外象维生素E、维生素B12、黑素等都可被不同程度地光氧化。 　　细胞杀伤作用 　　PDT可直接杀伤细胞。就大多数光敏剂而言，细胞膜、线粒体和溶酶体是对PDT最敏感的亚细胞结构，其他细胞器如内质网、微管、核糖体、细胞核等也可都可能受到损伤破坏。当细胞结构的损伤破坏达到不可修复的程度时，细胞就会死亡。 　　细胞膜的主要成分是脂质和蛋白质，两者对光敏作用都很敏感。PDT可引起膜蛋白肽链内、肽链间的共价交联，Na+ /K+ ATP酶、Mg++ ATP酶、5’-核苷酸酶等多种与膜结合的酶失去活性，导致膜转运功能障碍，核苷和氨基酸转运被抑制，钙、钠离子进入细胞增加，镁、钾离子外流。PDT可使细胞膜脂质过氧化物积聚，脂膜流动性降低。单态氧使膜脂中不饱和脂肪酸被氧化成丙二醛，破坏膜结构的完整性，可引起红细胞溶血反应。 　　光动力可引起线粒体的显著破坏，线粒体的呼吸活动和氧化磷酸化中断、钙离子摄取被抑制，线粒体肿胀，线粒体膜破裂。PDT后细胞内ATP水平下降，且与药物浓度和照光剂量呈依赖关系。 　　PDT对细胞核有一定的损伤作用，引起DNA发生单链断裂和形成一些单链区，DNA单链断裂和姐妹染色单体交换、DNA-蛋白质交联等改变。DNA损伤涉及到PDT是否有致癌突变的问题，但迄今尚未见到肯定PDT有致癌突变的报道。许多研究表明，PDT引起的染色体畸变率低于放射