鸡褪黑激素受体基因的多态性及其在不同组织中表达量的分析-动物遗传育种与繁殖专业论文.docxVIP

山东农业大学硕士学位论文 山东农业大学硕士学位论文 鸡褪黑激素受体基因的多态性及其在不同组织中表达量的研究 鸡褪黑激素受体基因的多态性及其在不同组织中表达量的研究 PAGE PAGE 1 PAGE PAGE 2 中文摘要 褪黑激素（Melatonin，MEL）是松果体和视网膜分泌的一种重要内分泌激素，它在 多个物种的多个组织中广泛存在，是光照信息同生殖系统协调关系中的重要信号，光照 对繁殖机能的调节依靠褪黑激素介导，与褪黑激素受体（Melatonin receptor，MTNR） 结合来调节动物的昼夜节律和繁殖变化。本研究旨在从分子水平上了解鸡 MTNR 基因 的遗传变异以及开产前后不同组织的表达差异，以便为地方鸡种的遗传改良提供依据。 研究结果如下： 以文昌鸡为研究对象，设计了多对引物，运用克隆测序及直接测序方法，分别扩增 MTNR1A、MTNR1B 和 MTNR1C 三个受体基因的 5′UTR 和外显子区域，并与文昌鸡的 产蛋性状做关联分析。结果表明：MTNR1B 受体基因的 5′UTR 存在 14 个 SNPs 以及 1 个插入缺失位点。其中-778 位点突变基因(A→G)对文昌鸡中期(22-31 周龄)产蛋数和 46 周龄总产蛋数的显性效应分别为达到了 2.3 枚和 6.2 枚。对后期(32-46 周龄)产蛋数和 46 周龄总产蛋数而言，-216 位点 C 对 A 为优势等位基因，加性效应值分别为 2.5 枚和 3.2 枚；显性效应分别为 3.5 枚和 6.8 枚，且表现为超显性。两个位点的单倍型分析表明， AA 单倍型对 46 周龄的总产蛋数效应值在 4 种单倍型中最低；AA/AA 合并基因型母鸡 的开产日龄显著晚于 AC/AA 和 GC/GC 基因型个体(P 0.05)。MTNR1A、MTNR1B 受体 基因的外显子高度保守，而在 MTNR1C 受体基因 exon3 上存在 C378T 和 G381A 两个 SNPs 位点，但是这两个位点并没有导致氨基酸的改变。 以 β-actin 基因为内标，运用 qRT-PCR 方法，比较了 MTNR1A、MTNR1B 和 MTNR1C 基因在心脏、肝脏、输卵管、卵巢、脑和视交叉组织及在鸡开产前后表达量的差别。结 果表明：MTNR1A 基因在不同组织开产后均表现为表达上调（除脑中表达下调外），在 开产前后和开产前各组织中的表达量差异并不显著，但在开产后各组织中的表达量差异 显著，且以卵巢表达量最高。与开产前相比，开产后各组织中 MTNR1B 和 MTNR1C 基 因除在视交叉表现为表达上调外，在其余组织中的表达量均呈现下调趋势。MTNR1B 基 因在同一组织开产前后表达量的差异并不显著，但在开产前或开产后的不同组织中表达 量有显著差异，且均以视交叉表达量最高，卵巢中表达量最低；而 MTNR1C 基因除在 开产前或开产后的不同组织中表达量有显著差异外，在心脏、输卵管、脑组织开产前后 也有显著差异。 本研究的结果可为深入探讨褪黑激素受体基因调控鸡繁殖性能的机制提供参考。 关键词：文昌鸡，褪黑激素受体基因，多态性，产蛋性能，关联分析 ABSTRACT Melatonin (MEL), is an important endocrine hormone secreted by pineal gland and retina, which widely exists in multiple tissues of many kinds of species. It is the important signal of the compatible correlation between illumination information and the reproductive system. Regulation of illumination on reproductive function relays on mediation of MEL which combined with melatonin receptor (MTNR) to adjust animals’ circadian rhythm and breeding change. This study aims to understand the genetic variation of gene MTNR and its differential expression in different tissues between open antenatal and open postpartum, so as to give some advices to genetic improvement of na