课件：AD转基因模型研究进展.ppt

THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 可编辑 可编辑 AD转基因模型研究进展 目录 1、AD简介 2、转APP基因小鼠 3、转早老蛋白基因小鼠 4、转载脂蛋白E（ApoE）基因小鼠 5、双转基因小鼠 7、小结与展望 AD简介 AD转基因动物模型具有明确的AD病因,并具有AD的病理与功能变化，可望成为研究AD发病机制及治疗药物的理想模型。 AD转基因鼠的诞生为AD发病机制及治疗的研究带来了新的曙光。 转APP基因小鼠 PDAPP小鼠、APP23小鼠、TGCRND8小鼠 APP23小鼠 这类小鼠的突变基因的启动子及表达调控元件是鼠类Thy-1.2，来源于C57BL／6小鼠。APP23小鼠比正常小鼠脑内多7倍的APP，并且在6个月时已有Aβ沉积。24个月时出现炎性反应：神经炎、突触损伤及tau过度磷酸化。 空间记忆障碍开始出现在3个月时，到6、8、25个月时进行性加重[1]。有研究发现[2]，在探针实验中低剂量加兰他敏能够改善小鼠的空间精确度，美金刚胺能够提高此种转基因小鼠工作能力的获得与空问精确度，呈剂量依赖关系。 转早老蛋白（PS）基因小鼠 PS基因位于14号染色体，中枢神经系统PS主要集中在海马和皮层内。PS是一种跨膜蛋白，可在细胞中与APP形成复合物，参与APP转运 及合成后加工。已发现至少有35种PS基因突变与AD有关，野生型PS有抗凋亡作用；突变型PS易裂解，可诱导神经元内Aβ增多。 为了弄清PS的正常功能，Jackson实验室在转PS基因鼠类同系物制造了一种定向的无效突变，将断裂的外显子2和3以新霉素为载体注入B6129S小鼠的胚胎干细胞，繁殖出的下一代与C57BL／6J交配得到该种小鼠。 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 其纯合子在自然分娩或剖腹产后立即死亡，并伴骨骼严重畸形，发病初期即出现中枢神经系统广泛严重出血，神经发生亦受到损伤，存在大量神经元丢失，提示PS对于小鼠骨骼轴的形成、正常神经发生、神经元存活都是必需的[3]。 转载脂蛋白E（ApoE）基因小鼠 ApoE基因位于19号染色体，具有多态性，有3种等位基因ε2、ε3、ε4，分别表达ApoE2、ApoE3、ApoE4，以ApoE3最常见，占78％。ApoE4是AD相关联的危险因素，对含有APP突变的FAD有促进作用，但对具有PS突变的FAD没有作用[4]。 在认为65岁以后发病的AD主要与ApoE4有关并且ApoE4参与了β淀粉样斑的形成。含有ApoE4表型的AD患者大脑中Aβ40和Aβ42免疫反应斑的水平都比不含ApoE4表型的AD患者水平要高。缺乏ApoE4的小鼠与PDAPP小鼠杂交的后代表现出Aβ沉积显著减少。 ApoE4与Aβ亲和力强，体外混合可产生沉淀，它不能与tau蛋白结合，但能使tau蛋白磷酸化增加，干扰微管的装配和完整性，导致NFT。ApoE2和ApoE3使AD发病率降低、发病年龄推迟。 双转基因小鼠 APPswe／PSl小鼠 Wengennck等[5]制作了APPswe／PS转基因小鼠，表达人突变的PS基因和APP基因，12周后在转基因鼠皮质和海马发现Aβ沉积，此后到第54周，Aβ沉积明显增加。此模型用于研究PS在Aβ沉积中的作用。 小结与展望 研究认为理想的AD动物模型应具备以下3个方面的特征： ①具有AD的主要神经病理学特征——SP和NFT ②出现大脑神经元死亡、突触丢失和反应性胶质细胞增生等AD的重要病理变化 ③出现认知和记忆功能障碍 参考文献 [1] ELLY PH，BONDOLFI L，HUNZIKER D，et a1．Progressive Age-related Impairment of Cognitive Behavior in APP23 TransgeKnic Mice[J]．Neurobiol Aging(S0197—4580)，2003，24(2)：365—378． [2] VANDAMD，DEDEYN PP．Cognitive Evaluation of Disease-modifying Efficacy of Galantamine and Memantine in the APP23 Model[J]．Eur Neuropsychopharmacol(S0924—977X)，2006，16(1)：59—69． [3] SHENJ，BRONSON RT，CHEN DF，et a1．Skeletaland CNS Defects in Presenilin-1一deficient Mice[J].Cell(S0092—8674)，1997，89(4)：629—639． [4] HWAN