高效液相色谱法原理与应用_.ppt

* 封 尾 封尾是用如三甲基硅烷等小分子与键合了C18以后的硅胶进行进一步的反应。 由于硅烷相对很大的体积，使得C18 和其它键合相在发生键合反应时只能覆盖不到硅胶表面的 50% 。 硅胶表面未被键合的酸性硅羟基将会与被分析物相互作用，特别是在中性条件下会对强碱性化合物产生严重的峰形拖尾。 封尾工艺使得表面残余的硅羟基被进一步的消除，为小分子所取代。 封尾工艺能促使色谱柱对极性和碱性化合物的分离具有良好的峰形。 * 理论塔板数 N 粒径 (μm) 柱长 (cm) 塔 板 数 N 10 15 6,000-7,000 10 25 8,000-10,000 5 10 7,000-9,000 5 15 10,000-12,000 5 25 17,000-20,000 3 5 6,000-7,000 3 7.5 9,000-11,000 3 10 12,000-14,000 3 15 17,000-20,000 色谱柱的柱效高意味着色谱柱装填得好 * 评价色谱柱好坏的标准 1）理论塔板数N 2）拖尾因子Tf 3）色谱柱背压 4) 色谱柱批与批之间的重现性 5）pH值的适用范围 6）使用寿命 * 拖尾因子Tf As = 1.0-1.05 很 好 As = 1.2 一 般 As = 2 差 As =