拟南芥线粒体和质外体H2O2对抗病性的影响.pdfVIP

拟南芥线粒体和质外体H202对抗病性的影响 二、水通道蛋白的基本功能……………………………………………………21 三、水通道蛋白的结构特点……………………………………………………22 第二部分研究报告 第一章核黄素结合蛋白与核黄素结合改变H202浓度并影响抗病性…………………25 l材料与方法………………………………………………………………………26 1．1材料准备与处理……………………………………………………………一26 1．2基因表达分析………………………………………………………………一27 1．3RfBP的原核表达与SDS．PAGE及Westem blotting分析………………．．28 1．4 RfBP生物活性的测定与免疫反应测定……………………………………28 1．5植物总蛋白提取的提取与His．tags蛋白的纯化……………………………29 1．6叶片内黄素含量的测定……………………………………………………．．30 1．7H202定量测定………………………………………………………………．30 1 1．8鱼藤酮(rotenone)处理………………………………………………………．3 1 1．9病原菌接种和抗病性评价…………………………………………………．．3 2结果与分析………………………………………………………………………32 2．1核黄素结合蛋白的免疫分析与检测………………………………………．．32 2．3RfBP对拟南芥抗病性的影响………………………………………………37 3讨论…………………………………………………………………………………………………………38 第二章Hpal诱导质外体H202的产生并影响抗病性…………………………………．41 1材料与方法………………………………………………………………………43 1．1实验材料和植物培养条件…………………………………………………．43 1．2转基因拟南芥的产生…………………………………………………………45 1．3病原菌接种和抗病性评价…………………………………………………．．47 1．4免疫定位实验………………………………………………………………．．48 1．5DPI药理学实验………………………………………………………………49 1．6Hpal的外施和植物反应实验………………………………………………49 1．7OsPIPl：3蛋白的位点突变与膜酵母双杂交验证…………………………一49 2结果与分析………………………………………………………………………52 2．1Hpal增强转基因拟南芥的抗病性…………………………………………52 2．2H202参与了Hpal转基因拟南芥的抗病过程……………………………．．55 万方数据 目蒙 2．3 3讨{念…………………………………………………………………………………………………………58 总结与展望………………………………………………………………………………一63 参考文献…………………………………………………………………………………一65 攻读硕士学位期间发表论文情况………………………………………………………．．71 致谢……………………………………………………………………………………………………………………．．73 万方数据 摘要 拟南芥线粒体和质外体的H202对抗病性的影响