黄姜水解液发酵生产D-葡萄糖酸钠及发酵抑制物控制研究-微生物学专业论文.docxVIP

黄姜水解液发酵生产D-葡萄糖酸钠及发酵抑制物控制研究-微生物学专业论文.docx

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独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知,除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或 集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在 文中以明确方式标明。本人完全意识到,本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名: 日期: 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借 阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进 行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本论文属于 保密□ ,在 年解密后适用本授权书。 不保密□。 (请在以上方框内打“√”) 学位论文作者签名: 指导教师签名: 日期: 年 月 日 日期: 年 月 日 华 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 I I 摘 要 D-葡萄糖酸钠是一种多羟基有机酸盐,生物发酵法因反应条件温和,设备要求 低,无污染等优点已成为生产 D-葡萄糖酸钠的主要方法。然而,直接以葡萄糖为碳 源,使葡萄糖酸及其衍生物的价格居高不下。本文以非粮原料黄姜水解液为碳源, 选用黑曲霉(Aspergillus niger 1)发酵生产 D-葡糖糖酸钠,从发酵产量入手,分析 黄姜水解液中的抑制因素,采用预处理以及酶降解的方法去除其中的抑制因子,以 达到降低成本和提高发酵产量的目的。取得如下研究结果: (1)首次利用黄姜水解液发酵生产 D-葡萄糖酸钠,初始转化率为 26.0%,表明 直接利用黄姜水解液对发酵存在一定的抑制作用。通过检测发现,该水解液中含有 丰富的氨基酸、维生素等营养成分,进一步分析黄姜水解液成分并去除抑制因素后, 该糖液可作为 D-葡萄糖酸钠发酵的优质碳源。 (2)单因素实验表明,当黄姜水解液中糠醛和部分酚类化合物浓度高于 0.1 g/L 时,对微生物细胞生长、产物合成抑制作用明显。对比 D-葡萄糖酸钠转化率及生物 量,得出水解液中酚类物质的抑制作用强于糠醛、5-羟甲基糠醛,尤其对产物合成有 强烈抑制作用。通过 HPLC 定量分析,确定黄姜水解液中糠醛、5-羟甲基糠醛、香 草醛、丁香醛及 4-羟基苯甲醛的含量分别为 0.11 g/L、0.09 g/L、0.54 g/L、0.63 g/L 及 0.47 g/L,证明水解液中抑制性物质已超出安全浓度(0.1 g/L),会对 D-葡萄酸钠 的发酵产生抑制作用。 (3)黄姜水解液经过活性炭、碱、亚硫酸盐以及离子交换树脂预处理,葡萄糖 酸钠转化率分别提高了 26%、7%、9%及 15%,其中,活性炭处理后发酵转化率提高 了将近 1 倍,表明了活性炭预处理效果最佳。活性炭预处理后,水解液中糠醛、5- 羟甲基糠醛、香草醛、丁香醛及 4-羟基苯甲醛的浓度分别降低至 0.02 g/L、0.02 g/L、 0.23 g/L、0.32 g/L 及 0.21 g/L,表明去除或降低水解液中抑制物可在一定程度上解除 其对发酵的抑制。 (4)通过研究漆酶对黄姜水解液中抑制物的降解作用,得出漆酶可以降解其中 II II 80%的酚类物质,使香草醛、丁香醛及 4-羟基苯甲醛浓度分别降至 0.14 g/L、0.19 g/L 及 0.1 g/L,接近安全阈值浓度(0.1 g/L),利用此糖液发酵生产 D-葡萄糖酸钠,转化 率提高了 50.5%。黄姜水解液经过活性炭预处理后,再使用漆酶处理,结果表明,其 中 80%以上的呋喃类物质和酚类物质被去除,葡萄糖酸钠转化率达到 76.5%,与不 进行任何处理的黄姜水解液直接发酵相比,葡萄糖酸钠转化率提高了 2~3 倍。 关键词:黄姜水解液;D-葡萄糖酸钠;抑制因子;预处理;漆酶 PAGE VI PAGE VI Abstract Sodium gluconate is a multi-hydroxy organic acid salt. Bio- fermentation has become the main method of producing sodium gluconate in industry by virtue of mild reaction conditions, low equipment requirements, no waste water and gas produced, etc. However, mature fermentation uses glucose as carbon source, resulting in the high price of acid glucose and its deriva

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