中药指纹图谱广州中医药大学课件魏刚.pptVIP

第一节 概论 定义 中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该药材特性的共有峰的图谱 基本属性 整体性 模糊性 第二节 中药指纹图谱测定方法 研究对象的不同，指纹图谱研究的方法与技术也不同，并都随着现代科技技术的发展而发展。 中药指纹图谱研究所采用的方法主要有色谱法、光谱法和生物学方法。 2.1 色谱法 2.1.1 薄层色谱法（TLC） 薄层色谱法为传统的定性、定量分析方法 优点：操作简单、分析速度快、适用范围广 缺点：重现性、精密度差。 可作为中药指纹图谱研究的借鉴与补充 2.1 色谱法 2.1.2 气相色谱法 适用于含挥发性成分中药指纹图谱的研究和运用 特点：分离效能高、分析速度快、重现性好分辨率高等等，不足：分析范围局限于低沸点成分 为中药指纹图谱研究的主要方法之一 2.1 色谱法 2.1.3 高效液相色谱 中药样品中含有的成分绝大多数可在高效液相色谱仪上进行分析检测，方法成熟，中药指纹图谱研究应优先考虑高效液相色谱法。 具有分离效能高、选择性高、检测灵敏高、分析速度快、应用范围广等特点。 2.1 色谱法 2.1.4 其他 高速逆流色谱（HSCCC） 高效毛细管电泳（HPCE） 超临界流体色谱（SFC） 等等 2.2 光谱法 2.2.1 紫外-可见光谱法和红外光谱法 这两种方法能够给出药效物质基础的结构信息，但所给出的信息是所有化学物质结构结构信息的加和。 2.2 光谱法 2.2.2核磁共振法及X射线衍射法 这两种方法能给出药效物质基础的结构信息，部分信息也可能与特定化学成分直接关联。 2.2 光谱法 2.2.3 质谱法 不同中药由于含有不同化学成分的种类和比例不同，所得质谱显示的分子离子峰及进一步裂解的碎片离子峰（m/z）亦不一致，故质谱同样具有指纹性较强的特征。 2.3 生物学方法 2.3.1 中药中药DNA指纹图谱 2.3.2 基因组学指纹图谱 2.3.3 中药蛋白组学指纹图谱 2.4 联用技术 第三节 中药指纹图谱研究程序及技术要求 技术要求 专属性：能够表达品种特征的性质 重现性：不同实验室/操作者，结果有较高的相似性 可操作性：方法/条件易于推广和便于操作 主要程序 样品收集、方法建立、数据分析、样品评价和方法检验等 3.1 样品收集 对象：原药材、饮片及提取物、半成品及各类制剂和相关产品 样品具有真实性代表性 量：不少于10批 3.2 供试品溶液的制备 根据中药中所含成分的理化性质和检查方法的要求，选择适当的制备方法，确保该中药的主要化学成分或有效成分在指纹图谱中得以体现。 3.2 供试品溶液的制备 原药材、饮片或提取物供试品溶液的制备 半成品（中间体）供试品溶液的制备 各类制剂和相关产品供试品溶液的制备 3.3对照品（参照物）溶液的制备 （1）对照品（参照物）的选择 选择合适的对照品（参照物），以确定图谱中参照峰的位置和丰度 （2）对照品（参照物）溶液的制备 制成标示浓度（g/ml或mg/ml）的溶液 3.4 指纹图谱试验研究 通过比较试验，从中优选相对简单易行的方法和条件，获取足以代表品种特征的指纹图谱，以满足指纹图谱的专属性、重现性和普遍适用性的要求，并须通过方法学验证 3.5 方法学验证 3.5.1 稳定性试验 考察供试品一定时间内的稳定性 同一供试品，间隔一定时间进样 N≥5，RSD≤3% 3.5 方法学验证 3.5.2 精密度试验 主要考察仪器的精密度 同一供试品，连续进样 N≥5，RSD≤3% 3.5 方法学验证 3.5.2 重复性试验 主要考察实验方法的重复性 同一批号的供试品 N≥5，RSD≤3% 3.6 指纹图谱的建立和辨认 根据已确定的试验方法和条件，对供试样品进行测定，将获得的指纹图谱逐一研究比教较，找出药材色谱中具有指纹意义的各个谱峰，编号，再将药材、半成品和成品之间的图谱进行比较，便于清楚地考察相互之间的相关性。 3.6 指纹图谱的建立和辨认 一个品种的指纹图谱是由各个具有指纹意义的峰组成的完整图谱构成，各个有指纹意义的峰，其位置、大小或形状，各峰之间相对的比例等是指纹图谱的综合参数，辨认和比较时应该从整体的角度综合考虑 * * 中药指纹图谱 魏刚 研究员 2.2 光谱法 紫外-可见光谱法 核磁共振波普法 红外光谱法 质谱法 X-射线衍射法 固定品种来源、产地、采 收期和加工炮制的中药 10批次以上 中药样品 供试品溶液 不同品种来源、产地、采 收期或加工炮制的中药 中药 未知检品 评价标准 药效学实验 中药指纹图谱 图谱信息 性代表 性一均 理处预 理处预 价评质品析分试测谱图 验检