分子生物学课件真核生物表达调控.pptVIP

真核生物基因调控根据性质可分为两大类: 第一类是瞬时调控或称可逆性调控,包括: 某种底物或激素水平的升降,酶活性和浓度的调节 。 第二类是发育调控或称不可逆调控，它决定了真核细胞生长、分化、发育的全部进程。按调控发生的先后次序也可分为如下过程：图9-1 1、DNA水平的调控：是真核生物发育调控的一种形式,它包括：基因丢失、甲基化、扩增、重排、等方式。 基因丢失：目前认为这种调节方式主要是在较低等的真核生物中。如马蛔虫，只有在生殖细胞核中保持个体发育的全部基因，而体细胞核中却失去了一部分基因。在原生动物和昆虫中也有类似现象，体细胞不具有全能性。高等生物没有发现类似的现象，可进行体细胞核移植。 （４）ＤＮＡ甲基化　Robertson KD，Nature Reviews Genetics, 6(8）：597－610 Aug 2005DNA甲基化是一种重要的基因组表观遗传修饰，参与调控许多细胞过程，包括胚胎发育、转录、染色质结构、X染色体失活、基因组印迹以及染色体稳定性。同这些重要功能相符合的是，越来越多的人类疾病被发现同DNA甲基化的异常有关。对这些疾病的研究提供了对DNA甲基化以及其他表观遗传修饰在发育和正常细胞动态平衡中的作用的新认识。 （1）染色质结构影响基因转录：细胞分裂时松开分散在核内的染色质称为常染色质(euchromatin)，常染色质的基因可以转录。染色体中的某些区段到分裂期后，仍保持紧凑折叠的结构，在间期核中可以看到其浓集的斑块，称为异染色质(heterochromatin)，基因不能转录表达。 原本在常染色质中表达的基因如移到异染色质内也会停止表达；哺乳类雌体细胞2条X染色体，到间期一条变成异染色质者，这条X染色体上的基因就全部失活，可见紧密的染色质结构阻止基因表达。 1、顺式作用元件(cisacting elements) 真核基因的顺式调控元件是基因周围能与特异转录因子结合而影响转录的DNA序列。其中主要是起正性调控作用的顺式作用元件，包括启动子(promoter)、增强子(enhancer)；近年又发现起负性调控作用的元件沉寂子(silencer)。 真核启动子间不像原核那样有明显共同一致的序列，而且单靠RNA聚合酶难以结合DNA而起动转录，而是需要多种蛋白质因子的相互协调作用。 真核启动子一般包括转录起始点及其上游约100－200bp序列，包含有若干具有独立功能的DNA序列元件，每个元件约长7－30bp。最常见的哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中的元件序列见表9－1。 表 －1　哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件 原核生物 TTGACA --- TATAAT------起始位点 -35 -10 真核生物 增强子---GC ---CAAT----TATAA—5mGpp—起始位点 -110 -70 -25 ① 核心启动子元件(core promoter element ,CPE)　指RNA聚合酶起始转录所必需的最小的DNA序列，包括转录起始点及其上游－25处的TATA盒。核心元件单独起作用时只能确定转录起始位点和产生基础水平的转录。 ②上游启动子元件(upstream promoter element ,UPE)或称上游激活序列（upstream activating sequence,UAS)包括通常位于－70bp附近的CAAT盒和GC盒、以及距转录起始点更远的上游元件。这些元件与相应的蛋白因子结合能提高或改变转录效率。不同基因具有不同的上游启动子元件，其位置也不相同，这使得不同的基因表达分别有不同的调控。 是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约200bp的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。增强子通常占100－200bp长度，也和启动子一样由若干组件构成，基本核心组件常为8－12bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。 ①增强子提高DNA链上基因转录效率，可以远距离作用，通常可距离1－4kb、甚至30kb仍能发挥作用，而且在基因的上游或下游都能起作用。 ②增强子作用与其序列的正反方向无关，将增强子方向倒置依然能起作用。 ③增强子要有启动子才能发挥作用，否则增强子不能表现活性。但增强子对启动子没有严格的专一性，同一增强子可以影响不同类型启动子