第6章-基因工程的酶学基础.pptVIP

3’AAAAAAAAAAAA 5’mRNA 5’TTTTTTTTTTTT oligo (dT) 12-18 反转录酶 Mg2+ dNTP 3’AAAAAAAAAAAA 5’mRNA 5’TTTTTTTTTTTT 3’cDNA 反转录酶 3’ RNA 5’ DNA 3’ RNA 5’ DNA 3’ 5’ 反转录酶 5’ DNA 3’ 反转录酶的基本特性：双向外切DNA-RNA杂合链中的RNA链 5’ 3’ 6.4 DNA 修饰酶 （一）末端脱氧核苷酸转移酶（TdT） 简称末端转移酶 来源：小牛胸腺 特点： 末端转移酶是一类不依赖于DNA模板的DNA聚合酶。 在没有模板链的情况下，可以非特异性的将核苷酸连接到dsDNA或ssDNA的在3’-OH。 可以同聚物加尾 如果以dATP或dGTP为同聚物加尾反应的底物则以Mg2+为首选； 如果以dTTP或dCTP为同聚物加尾，则必需有Co2+存在。 5’ p 3’ HO OH 3’ p 5’ TdT Mg2+ dATP 5’ p 3’ AAAAAA AAAAAA 3’ p 5’ 主要用途： 用于克隆DNA片段：平末端DNA片段的末端加尾连接法 用于DNA片段3’末端标记 平末端DNA片段的末端加尾连接法 3’ 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 末端核苷酸转移酶 +dATP +dTTP 3’ 3’ 5’