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* 实验课教学的主要目标是使我们了解医学微生物学主要的研究方法和手段,掌握基本技能和基本原理,树立牢固的无菌观念 细菌的分布 一.细菌在自然界的分布 二.细菌在人体的分布 一.细菌在自然界的分布 (一)土壤中的细菌 以细菌为主,放线菌次之,还有真菌、螺旋体等。存在致病菌:破伤风杆菌、产气荚膜杆菌、肉毒杆菌、炭疽杆菌致创伤感染。 (二)水中的细菌 存在有:伤寒沙门菌、痢疾志贺菌、霍乱弧菌、钩端螺旋体、甲肝病毒等。 (三)空气中的细菌 真菌孢子、结核杆菌、白喉杆菌、脑膜炎球菌、金葡菌、链球菌等 二.细菌在人体的分布 正常菌群: 存在于正常人体,在人体免疫功能正常时对人体无害的微生物。 正常成人机体由1013细胞组成,人体携带的细菌相当于人体细胞的10倍即,达1014。 人体各部位的微生态系 1.口腔微生态系:已发现有300多种,口腔链球菌是优势菌,约占50% 2.肠道:肠内微生物(细菌为主)约占人体微生物总量的80%,占粪便总量的30%~40%,厌氧菌为需氧菌的100~1000倍。 3.阴道:常住菌主要有乳杆菌、肠杆菌、丙酸杆菌等,乳杆菌具有产生酸性生存环境,生物屏障及免疫激活作用。 5.呼吸道 :有200多个菌种,鼻腔液中以厌氧菌为最多。气管和支气管正常情况下仅有少量细菌,细小支气管以下部位、肺及胸腔无菌存在。 正常菌群与人体的关系: (一)对人体有利: 1.生物拮抗 2.免疫作用 3.营养作用 4.抗衰老作用 (二)对人体有害(微生态失调) 1.菌群失调:正常菌群之间的比例关系发生了改变,出现生态不平衡现象。 菌群失调症、二重感染 2.机会性感染(条件致病菌感染) 由正常菌群在机体 ⑴免疫功能低下、 ⑵寄居部位改变 ⑶抗生素的使用不合理 等特定条件下所引起的感染称机会性感染。 消毒与灭菌 讲述内容 一.概念:消毒、灭菌、无菌、防腐 二.消毒灭菌法 物理学方法 化学方法 生物学方法 一.概念: 消毒: 杀死物体上病原微生物的方法. 灭菌杀灭物体上所有微生物的方法. 防腐: 防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法 无菌:不存在活菌的意思. 卫生清理:将微生物污染的无生命物体表面还原为安全水平的过程。 二.消毒灭菌方法 (一) 物理学方法 ↗热 物理方法 →紫外线 ↘电离辐射 ↘超声波 ↘过滤等 热力灭菌法 干热灭菌法 焚烧 烧灼 干烤 红外线 湿热灭菌法 巴氏消毒法 煮沸法 流动蒸气消毒法 间歇蒸气灭菌法 高压蒸气灭菌法 同一温度下,湿热比干热效果好 热 干热灭菌法: 1.焚烧与烧灼:如污染物品或传染病的人及动物尸体。 2.干烤:160~170℃、2h,耐热物品灭菌。 湿热消毒灭菌法: 1.巴氏消毒法: 61.1~62.8℃或 71.7℃、15~30s 2.煮沸消毒:100℃ 5min 3.流通蒸气消毒:打开蒸气 80~100℃ 15~30min 4.间歇灭菌:反复进行3次流通蒸气消毒,中间有2次培养。 100℃ 30min→过夜培养→100℃30min→过夜培养→100℃ 30min 5.高压蒸气灭菌:121.3℃ 15~30min 湿热灭菌法比干热法好:湿热灭菌有水分子参与,可使蛋白质彻底变性凝固。湿热的穿透性强。湿热的蒸气可释放出潜热更好的杀菌。 紫外线:波长200~300nm有杀菌作用。265~266nm杀菌作用最强。机制:破坏细菌的DNA结构致细菌死亡 过滤除菌:只能除掉大的细菌,病毒、支原体等小的微生物不能除掉。常用于不耐热的血清,抗毒素,生物药品等的除菌。 干燥与低温抑菌法: 低温可使细菌的新陈代谢减慢,故常用于保存菌种。如冷冻真空干燥法是目前最好的保存菌种的方法。 (二)化学消毒法 常见消毒剂的种类用途见表 消毒剂的杀菌机制: 1.使菌体蛋白变性或凝固(醇、酚、醛) 2.干扰酶系统和影响代谢(氧化剂、表面活性剂、酚类等)
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