动力相关蛋白1在缺氧／复氧诱导人肾小管上皮.pdf

　ｈｔｔｐ：／／ａａｍｍｔ．ｔｍｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ　　 　　　　　　第三军医大学学报，２０１６，３８（１１） １２５１ ＤＯＩ：１０．１６０１６／ｊ．１０００５４０４．２０１５１１１３１ 动力相关蛋白１在缺氧／复氧诱导人肾小管上皮细胞焦亡机制中的作用 陈　雨，侯卫平，袁发焕　　（４０００３７重庆，第三军医大学新桥医院肾内科，全军肾脏病中心，重庆市肾脏病研究所， 国家中医药管理局重点专科） 　　［摘要］　目的　观察人肾小管上皮细胞（ＨＫ２细胞）缺氧／复氧（ｈｙｐｏｘｉａ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ，Ｈ／Ｒ）损 伤时线粒体动力相关蛋白１（ｄｙｎａｍｉｎｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ１，Ｄｒｐ１）、Ｎｏｄ样受体热蛋白结构域相关蛋白３ （ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｂｉｎｄｉｎｇｏｌｉｇｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｄｏｍａｉｎｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒｆａｍｉｌｙｐｙｒｉｎｄｏｍａｉｎｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ３，Ｎｌｒｐ３）以及炎性 因子的表达改变和细胞焦亡情况，探讨Ｄｒｐ１在Ｈ／Ｒ诱导肾小管上皮细胞焦亡中的作用。方法　ＨＫ２ 细胞用含１０％胎牛血清的ＤＭＥＭ／Ｆ１２液培养于３７℃、５％ ＣＯ和９５％Ｏ 的恒温培养箱。将细胞分为 ２ ２ 正常对照组、Ｈ／Ｒ组、Ｈ／Ｒ＋Ｄｒｐ１抑制剂（Ｈ／Ｒ＋Ｍｄｉｖｉ１）组、Ｈ／Ｒ＋ｓｉＮｌｒｐ３腺病毒（Ｈ／Ｒ＋ｓｉＮｌｒｐ３）组、 Ｈ／Ｒ＋空腺病毒（Ｈ／Ｒ＋Ｓｃｒａ）组。检测细胞培养液上清乳酸脱氢酶ＬＤＨ活性，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测Ｄｒｐ１、 Ｎｌｒｐ３、凋亡相关蛋白１（ｃａｓｐａｓｅ１）、ＩＬ１ 表达，２′，７′二氯荧光黄双乙酸盐（ＤＣＦＨＤＡ）检测细胞活性氧 β （ＲＯＳ）水平，流式分析仪检测细胞焦亡情况。结果　与正常对照组比较，Ｈ／Ｒ组培养液上清ＬＤＨ和细 胞内ＲＯＳ水平明显升高，Ｄｒｐ１、Ｎｌｒｐ３、ｃａｓｐａｓｅ１、ＩＬ１ 表达增高，细胞焦亡明显增加，差异有统计学意义 β （Ｐ＜０．０５）；与 Ｈ／Ｒ组比较，Ｈ／Ｒ＋Ｍｄｉｖｉ１组培养液上清 ＬＤＨ和细胞内ＲＯＳ水平明显降低，Ｎｌｒｐ３、 ｃａｓｐａｓｅ１、ＩＬ１ 表达降低，细胞焦亡明显减少，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论　在Ｈ／Ｒ条件下， β Ｄｒｐ１通过激活Ｎｌｒｐ３炎性体诱导人肾小管上皮细胞焦亡。 　　［关键词］　 动力相关蛋白１；Ｎｏｄ样受体热蛋白结构域相关蛋白３；细胞焦亡；人肾小管上皮细胞； 缺氧／复氧损伤 　　［中图法分类号］　Ｒ３２２．６１；Ｒ３２９．２８；Ｒ３９４．２ ［文献标志码］　Ａ Ｒｏｌｅｏｆｄｙｎａｍｉｎｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ１ｉｎｈｙｐｏｘｉａ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｈｕｍａｎｒｅｎａｌ ｔｕｂｕｌａｒｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｐｙｒｏｐｔｏｓｉｓ ＣｈｅｎＹｕ，ＨｏｕＷｅｉｐｉｎｇ，ＹｕａｎＦａｈｕａｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｐｈｒｏｌｏｇｙ，ＫｉｄｎｅｙＤｉｓｅａｓｅＣｅｎｔｅｒ，ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆ ＫｉｄｎｅｙＤｉｓｅａｓｅ，ＫｅｙＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＳｔａｔｅＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＸｉｎｑｉａｏＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｈｉｒｄ ＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，４０００３７，Ｃｈｉｎａ） 　　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆｄｙｎａｍｉｎｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ１（Ｄｒｐ１），ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｂｉｎｄｉｎｇｏｌｉｇｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｄｏｍａｉｎｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒｆａｍｉｌｙｐｙｒｉｎｄｏｍａｉｎｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ３（Ｎｌｒｐ３）ａｎｄｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓａｎｄｔｈｅｐｙｒｏｐｔｏｓｉｓｄｕｒｉｎｇｈｙｐｏｘｉａ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ（Ｈ／Ｒ）ｉｎｊｕｒｙｉｎｈｕｍａｎｒｅｎａｌｔｕｂｕｌａｒｅｐｉｔｈｅｌｉａ