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植物离体快速繁殖 概念 植物离体快速繁殖(in vitro propagation),又称微体快繁(micropropagation). 是一种营养繁殖方法,短时间内产生大量遗传性一致的完整新植株的技术. 兰花工业 兰花以其高雅、美丽，带有神秘色彩而深受世界人民的喜爱。兰花的常规繁殖方法有分株法和播种法。在兰花的常规繁殖中， 有三个难以解决的问题：第一，用分株繁殖方法增殖缓慢，不利于新品种的推广；第二，种子繁殖困难，因兰花种子十分微小，胚很细弱，种子中贮藏的营养物质很少，在自然条件下，绝大多数种子会在发芽过程中夭折；第三，病毒感染严重，目前至少在兰花上鉴定出七种病毒。 采用组织培养的方法进行兰花的无性系繁殖，可以在一定程度上解决上述三个问题。 1962年法国的摩瑞尔(Morel)观察到虎头兰的茎尖在无菌的培养基上能够形成扁圆形的小球体，这些小球体与幼胚发育成的原球体非常相似，故称为原球茎。 在一定条件下，这些原球茎通过切割能够快速增殖，并再生成完整植株。摩瑞尔的这一发现很快被从事兰花的研究者和生产经营者应用到兰花新品种的快速繁殖中去，使优良品种在短短数年内可由一株繁殖到几十万株甚至更多，从根本上改变了兰花生产的面貌。 由于利用这一技术，使兰花可以像其他工业产品那样进行工厂化生产，故将这种生产兰花的方式称为“兰花试管苗工业”，简称“兰花工业”。 目前，“兰花工业”已成为许多国家花卉生产的重要行业。应用兰花试管苗生产技术已能够对近70个属数百种兰科植物进行工厂化试管苗生产，这些兰花具有重要的商业价值，如卡特兰、蝴蝶兰、石斛兰等。 植物(作物)种苗脱毒 农作物在种植过程中经常会受到病毒、细菌和真菌等病原体感染。人们为了降低农作物染病后所造成的损失，一般采用化学方法来清除入侵的真菌和细菌，但这种方法不能有效地清除入侵的病毒。 在植物生长过程中，侵入植物体内的病毒可以通过维管束和细胞壁间的胞间连丝扩散到所有的组织器官。但是植物的茎尖等分生组织处于分化的初级阶段，其组织内的维管束还未形成，此时植物体内的病毒只能通过胞间连丝移动到分生区，而这一移动过程远不及细胞分裂的速度，所以分生区一般不会受到病毒侵染。 人们正是利用这一特点，剥取茎尖分生区(0.1～0.5 cm)进行离体培养，以得到无病毒植株。 把茎尖分生组织从感染病毒的植株上剥离，在离体条件下进行组织培养，从而获得不含病毒的脱毒苗(virus-free cutting)，这一过程称为种苗脱毒。 5.1 植物离体快速繁殖的意义与作用 5.2 植物离体快速繁殖的基本程序 5.3 植物离体快速繁殖的影响因素 5.4 植物离体快速繁殖的常见问题 5.5 植物无糖组培快繁技术简介 5.1 植物离体快速繁殖的意义与作用 繁殖系数高,周期短,速度快 应用广,是推广良种的重要手段 繁殖材料用量少,不受季节限制,可实现周年工厂化生产 能获得无毒苗木无性系 木本植物的应用潜力巨大 植物离体快速繁殖存在的问题 外植体材料差异大 外植体容易污染 成龄材料分化率较低,快繁难度大 褐变和试管苗的玻璃化问题 试管苗的变异问题 5.2 植物离体快速繁殖的基本程序 1) 稳定的无菌培养体系的建立 2) 该体系的增殖、生长和增壮 3) 诱导茎芽生根形成小苗 4) 生根小苗移栽和驯化时期 5) 商品苗培育 5.2.1 稳定无菌培养体系的建立时期 主要包括外植体选择、灭菌、培养基选定和稳定化培养等环节 分离阶段、稳定化阶段和生产阶段 5.2.2 稳定培养体系的增殖、生长和增壮时期 划分为3个阶段: 培养物保存阶段、 培养物大量增殖阶段(主体阶段) 培养物生长和增壮阶段(进入生根阶段) 本时期的基本目标: 维持培养物的稳定状态 不断增殖茎丛达到需要阶段 如何达到这一目标? 对基本培养基、固化剂应用、植物生长调节物质及其它因素进行调整 继代培养的芽增殖途径:侧(腋)芽增殖 通过调节外源激素的相对配比来调控繁殖系数 通过控制继代培养的时间来改善外植体的生理生化状态,从而促进芽的增殖 细胞分裂素与生长素的比例是影响繁殖系数和不定芽质量的主要因素 5.2.3 诱导茎芽生根形成小苗时期 茎芽生根诱导的2条途径: 1. 试管(瓶)内生根 2. 试管(瓶)外生根 5.2.3.1 试管内生根 生根培养基的基本要求: 1) 总盐浓度较低,无机盐含量较低,通常为芽形成和增殖的1/2~1/4 2) 极低浓度的细胞分裂素或不含;适当浓度的生长素(IBA或NAA和增效剂PG结合使用) 3) 降低蔗糖浓度以促进生根 4) 添加较高的琼脂含量 培养条件: 1) 先暗培养1周再转入正常光照下培养;或缩短光照时间.均可提高生根率及生根速率 2) 某些木本植物生根需较高温度 3) 对于生根困难植物,可用滤纸桥作支持物托住嫩梢进