马传染性贫血病毒基因转移载体系统的构建及分析-预防兽医学专业毕业论文.docxVIP

摘要慢病毒如同其它逆转录病毒，可以将前病毒基因组持久地整合到感染细胞的染色体上并且在 感染的细胞和子代细胞中表达病毒基因．可以作为将目的外源基因引入细胞的载体。由于慢病毒 除了能够感染分裂状态的细胞外还具有感染非分裂细胞的能力，因而，慢病毒载体备受关注。以 HIV-1为基础的慢病毒基因转移载体是目前研究最为透彻的慢病毒载体。尽管已经在增加HIV载 体的生物安全性和减少产生具备复制能力的病毒方面做了很多改进，但要应用于人类I临床实验仍 然存在较大的安全隐患。因此，开发非灵长类慢病毒基因转移载体系统成为当前研究的热点之一。马传染性贫血病毒(Equine lnfectius Anemia Virus,EIAV)是一种非灵长类慢病毒．而且是基 因组结构最简单的慢病毒。中国EIAV驴白细胞弱毒疫苗株(EIAV-DLA)是目前唯一成功开发并 大规模应用的慢病毒疫苗。本研究的目的在于利用我国在马传染性贫血病毒(EIAV)研究上的成 果，在EIAV驴白细胞弱毒疫苗株的感染性克隆(pOK8266)的基础上，构建有中国特色的EIAV 基因转移系统，为基因治疗、疫苗的开发和马传染性贫血病毒或其它相关的病毒的致病机制和免 疫机制的研究提供一个新的研究手段。本实验利用反向遗传操作技术，以E1AV驴白细胞弱毒疫苗的感染性克隆质粒(pOK8266)为基础，刚CMV立即早期启动子替换了EIAV-5’啪t—U3区．