高效制备液相色谱在天然产物分离中的应用.pptVIP

高效制备液相色谱在天然产物分离中的应用 北京创新通恒科技有限公司 王智灵 wangzhiling@摘要 一、高效制备色谱的发展现状 二、制备色谱在天然产物分离中的应用 三、制备色谱发展的前景与展望 第一部分：发展现状 制备型高效液相色谱是一种使用高压,高流速液体输送系统,在高分 辨率 、大内径、高载量分离柱上进行样品高纯度分离的制备方法。 应用该方法分离的产品在纯度、回收率、分离效率方面远远优于传统 的制备方法 。 在不断的实践过程中对分离纯化的更高要求促使色谱在基础理论 上由线性色谱发展到非线性色谱。而且在试验方法上也出现了间歇式 到连续式的分离模式。 间歇色谱是色谱分离中的主要形式也是唯一形式，其特征是样品 进入色谱系统中后，必须完全流出色谱柱后才能进行下一次的分离纯 化，所以投料是间歇性的。 间歇式操作以常规的制备色谱为主，典型的有：美国Varian，法 国Vovasep，北京创新通恒，大连依利特。 对于制备色谱来说,其核心部件两个大的方面:流体输送与目标物分 离. 设备的流体输送采用高压力，高流速的泵：流速可以到每分钟几 升，例如创新通恒的P6000泵就达到了5L/min。 第一部分：发展现状 国产商品化的制备泵：北京创新通恒科技有限公司P6000系列: 流速范围：0-5000ml/min 最大耐压：10MPa 第一部分：发展现状 增加负载量是工业制备色谱要考虑的重要因素之一，色谱柱内径由几毫米 发展到几甚至几十厘米，目前最大的制备柱已经超过1米。为了提高生产效率， 色谱柱长度通常控制在25厘米以内，也就是我们经常所说的柱饼。 随着柱直径的增大，传统的分离柱已经不能达到理想的高柱效，柱结构也已 经发生了很大的变化。直径在5cm以上的色谱柱目前有轴向压缩、径向压缩，尤 其是轴向压缩柱（DAC）使用最为广泛。 动态轴向压缩(dynamic axial compression，简称DAC)技术是公认的装填制 备色谱柱(柱内径大于50 mm)的最佳技术，其原理是采用活塞装柱(匀浆填充)， 并在操作过程中保持柱床压缩状态以确保其稳定性。 DAC法填装的色谱柱柱床均匀、性能稳定、密度高、柱效高，柱性能的再现 性好。采用DAC工艺装填的色谱柱正在逐步主宰整个工业制备型色谱柱市场，柱 直径已从20mm发展到1.6m。 主要生产商有Novasep,Varian,Merck，在国内最近几年也出现国产DAC：北京 创新通恒科技有限公司的DAC从50mm-400mm，并且已经在生产中得到了应用。 第一部分：发展现状 商品化的动态轴向压缩柱： 柱内径：50-400mm 柱内径:1.6m 有效柱长：400mm 柱长:4m 第一部分:发展现状 国产商品化的制备色谱系统: 北京创新通恒科技有限公司LC6000系列 第一部分:发展现状 制备高效液相色谱需要的前期投入比较大,而且在使用过程中的成本也 比较高,而且制备色谱中的填料目前还以进口的为主。1套200mm内径的 DAC系统国产设备价格在70W左右(不包括填料)，而进口设备就更贵， 几乎是它的两倍。 制备色谱应用于产品的生产需要我们的产品具有相当的附加值。目前 我们的天然产物水平还处于这个产业链条中的中上游，下游产品我们涉 及的太少。上游产品的工业附加值太低，而下游产品我们又没有能很好 的开发。 因为这些原因的存在,目前在天然产物的分离过程中还很少采用制备液 相色谱来进行,我们的天然产物一般还限制于实验室规模或者标准品规模。 当然，国内也有厂家利用：北京金本草中药科技开发有限公司的AKJ 项目就采用了400mmDAC系统 第二部分:分离中的应用 天然产物中包含的成分复杂,有的达到几十种甚至上百种，因此 对于其中有效成分的分离一直是一项十分艰巨的工作。利用传统 的纯化方法：经典层析柱、重结晶等往往耗时而且对于成分复杂 的样品最终的产品纯度及收率也不高。 制备高效液相色谱分离技术具有分析速度快、效率高、灵敏度 好、选择性强、成分之间分离效果好等优点，在一定程度上解决 了传统分离方法所遇到的问题。近年来在天然产物的提取方面得 到了快速的发展 工业制备色谱作为一种生产设备,当然要考虑投入产出比,所以在 实际应用中产品的纯度、产量、生产效率三者都要考虑到，结合 这三者来进行制备工艺的优化。 下面我们来看