落叶松原花色素的分级及精细化利用研究-皮革化学与工程专业毕业论文.docx

Y，1002232四Itl大学博士学位论文 Y，1002232 四Itl大学博士学位论文 落叶松原花色素的分级及精细化利用研究 皮革化学与工程专业 博士生 杜晓 指导教师 石碧教授 落叶松树皮为我国林业的重要副产物，是来源广泛、数量丰富的可再生绿 色资源。树皮中约含有16％的原花色素类化合物，是很有利用价值的天然产物。 原花色素具有多种化学与生物活性，在食品、保健品、化妆品及医药等领域具 有广泛的应用前景。本论文以落叶松树皮为研究对象，运用单宁化学、天然产 物化学和精细化工等学科的理论和技术，对落叶松原花色素的提取及分级，多 聚原花色素级分的Pd／C催化氢解反应，以及上述分离制备产物的化学特性和生 物活性进行了系统研究。 在第一部分研究工作中，系统研究了落叶松原花色素的提取方法，采用二 次通用旋转组合实验设计，建立了相关数学模型。运用频度分析法及DPS数据 处理软件，对提取条件进行了优化设计。获得的优化提取条件是：原料用量为 8．如11．69、乙醇浓度为57--64％(V／IO、温度为60～70℃、提取时间95-107 mill， 提取4次。在该提取条件下，用数学模型所预测的总提取物及原花色素产率分 别为23．83％和16．27％，这与实测值相一致。总提取物及原花色素的提取率分 别为92．27％和93．39％，表明其提取效率较高。研究表明，该数学模型可以用 于评价提取参数及预测提取指标，并为生产应用提供了理论依据。 在此基础上，利用原花色素混合物中不同组分的极性与溶解性差异，对落 叶松原花色素提取物进行了萃取分级研究．通过分级，得到了低聚原花色素级 分(LOPC)、多聚原花色素级分(LPPc)和高聚原花色素级分(LPR)三种落 叶松原花色素级分，它们的产率分别为5．70％、4．82％和8．51％；各级分的萃取 比率分别为31．15％、26．37％和41．50％。采用二次通用旋转组合实验设计，运 ￡乙：：qOt ￡乙：：qOt 四川大学博士学位论文 用频度分析法及DPS数据处理软件，研究了萃取LOPC的最优条件。获得的优 化萃取条件是：试液用量为31．3～38．4mL、乙酸乙酯用量为62．0～63．7mL、温 度为25．7～26．4‘C、震荡时间为2．5～2．8s，连续萃取4次。在该条件下，用萃 取数学模型进行模拟，预测得到的LOPC的产率28．43％、纯度60．58％，这 与实测值相一致。研究认为该数学模型可用于评价萃取参数及预测萃取指标， 并为生产应用提供了理论依据。 基于上述研究，运用uv、吸、圆二色光谱(cD)和HPLC等现代仪器测 试手段，较深入地研究了落叶松原花色素级分的化学特性。UV扫描分析表明， LOPC、LPPC和LPR三种原花色素级分部具有黄烷醇类化合物的UV光谱特征， LPR还在可见光550 11111左右具有特征吸收峰。IR光谱分析表明，LOPC在2920 cml、1150 cm1处具有低聚原花色素的特征吸收峰，而LPPC和LPR无此特征 吸收峰。据文献报导，CD光谱的cotton峰振幅是随聚原花色素聚合度降低而 减弱。LOPC的cotton峰明显弱于LPPC的cotton峰，因此，初步判断LOPC 主要含低聚原花色素成分，LPPC主要含多聚原花色素。根据LPR难溶于水， 易溶于乙醇水溶液，并呈现红色的特性，这与文献所报道的红粉(高聚物)特 征一致。HPLC分析表明，三种原花色素级分的主要组分及其出峰时间存在明 显差异。LPR主要组分的出峰时间集中于15～25 mint LPPC的主要组分的出 峰时间集中于14～23min，其中的儿茶素(c)和表几茶素(Ec)的含量均极 低：LOPC的主要组分在15 rain以前出峰，其中儿茶素(c)、表儿茶素(Ec) 和原花青定Bl的含量均较高，且有13个组分与葡萄籽低聚原花色素的主要组 分一致，即LOPC具有低聚原花色素的组成特征。 为了更好地认识落叶松原花色素级分的精细化利用价值，系统研究了三种 原花色素级分与蛋白质、酶和微生物的相互作用，并从理论上阐述了其化学性 质与生物活性的关系。以明胶和酪蛋白作为探针分子，研究了原花色素级分与 蛋白质的复合反应。根据相对沉淀率(RA)判断，原花色素级分与蛋白质的结 合能力依次为LPRLPPcLOPC，即原花色素的聚合度越高，其与蛋白质的结 合能力越强。通过对酶抑制率的测定及抑制常数(Ki值)的求解，可以发现， 原花色素级分对a．淀粉酶、纤维素酶、果胶酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和脂肪酶 均有不同程度抑制作用。原花色素对酶的抑制作用可以用原花色素一蛋白质的复 Ⅱ 四川大学博士学位论文合反应模式进行阐释。进一步研究了原花色素级分抑制a．淀粉酶和胃蛋白酶的 四川大学博士学位论文 合反应模式进行阐释。进一步研究了原花色素级分抑制