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尿液淀粉酶活性测定报告 　　尿酶活性度的简易鉴别法　　尿素酶是一种人和动物胃肠道及泌尿道细菌感染中常见的酶，它既是人和动物中某些致病菌的致病因子之一，又是某些氮源性腐败物转化所必须具备的酶之一.它是人类首次获得晶体并发现含有Ni离子的金属酶。　　大豆饼粕是我国最常用的一种植物性蛋白质饲料，蛋白质含量42%～45%，可高达47%。但未经热处理或热处理不彻底的大豆饼粕中含有对畜禽有害的抗胰蛋白酶、脲酶、血球凝集素、皂角苷、甲状腺肿诱发因子以及抗凝血因子等抗营养因子，其中抗胰蛋白酶的影响最大，可导致动物胰腺肿大、胆功能异常，影响饲料蛋白质的消化、利用，降低其生物学效价，进而影响畜禽的正常生长发育和生产性能，尤其是对肉仔鸡。目前认为较好的大豆热处理方法是120℃高压处理15min或者105℃蒸煮30min。若加热过渡，在灭活抗胰蛋白酶等抗营养因子的同时，也会破坏热敏氨基酸，特别是赖氨酸、精氨酸、大大降低大豆饼粕的消化率及生物学价值。因此，加热程度不同，加工后大豆饼粕中有毒有害物质的含量不同，其营养价值和饲喂效果也不同。　　测定抗胰蛋白酶活性，可直接反映大豆饼粕中抗营养因子水平及加热程度，但该法比较复杂，因此在生产中广泛采用间接的方法——测脲酶活性法。脲酶活性与抗胰蛋白酶活性呈高度正相关，而且脲酶活性的测定方法与测定其他抗营养因子的方法相比较有简便、快速和经济的优点。许多国家都制定了脲酶活性标准，我国规定：大豆粕的脲酶活性不得超过。　　方法一：　　一、原理　　通过在有苯酚红指示剂的情况下，大豆饼粕中含有的尿素酶将试剂中尿素转化成为氨气使样面呈碱性红色反应，作为变性测量。苯酚红指示剂：—，—　　二、仪器：　　量筒、量杯、玻璃棒、培养皿、不锈钢勺、试剂瓶、滴瓶、烧杯、天平。　　三、试剂：　　1、NaoH　　2、H2SO4　　3、尿素苯酚红溶液溶解苯酚红于NaoH和35ml蒸馏水中，溶解21g尿素于300ml蒸馏水中。将两种溶液混合搅匀备用。　　四、操作步骤：　　1、用小烧杯倒出适量尿素苯酚红溶液，滴加H2SO4将其调至琥珀色。　　2、取一小勺粗细均匀的大豆饼原样，撒在培养皿里，加入适量的苯酚红溶液，　　轻轻的旋动以使皿内的样品能均匀浸湿。　　3、静止5分钟观察变色情况。　　五、结果判定：　　1、50%-70%的样品出现红点该豆饼热处理不足，为生品，根据与尿酸酶活性　　定量测定结果比较，这类豆饼的尿酸酶活性值在之间。完全未经热处理的生品，尿素酶活性在以上。　　2、25%左右样面出现红点该豆饼热处理适中，未熟品。尿素酶活性值在　　之间。　　3、5-25分钟后样面无任何红点出现，该豆饼热处理过度，为焦品尿素酶活性　　值在以下。　　六、注意事项：　　1、该实验为快速点滴实验，一定要掌握时间，结果判定不得超过五分钟以免造成误　　差。　　2、在正式试验前，调整尿素苯酚红溶液的颜色时要小心，快到终点时要半滴半滴沿　　着烧杯壁加入，充分要匀以免加入酸过量影响结果的测定。方法二：　　1、原理　　酚红指示剂：—，大豆制品中所含的尿素酶，在室温下可将尿素水解，产生氨，释放的氨可使酚红指示剂变红，根据变红时间长短来判断尿素酶活性大小。　　2、仪器和试剂　　粉碎装置：粉碎时应不产生强烈发热　　天平：感量　　试管：直径，长15cm　　尿素：分析纯　　酚红：分析纯、%乙醇溶液　　3、测定步骤　　将试样研细，称取试样,称准至重，转入试管中，加入结晶尿素及两滴酚红指示剂，加20—30mL蒸馏水，摇动10s钟。观察溶液颜色，并记下呈粉红色的时间。　　4、尿素酶活性的测定结果表示：　　1分钟内呈粉红色为活性很强。　　1—5分钟内呈粉红色为活性强。　　5—15分钟内呈粉红色为有点活性。　　15—30分钟内呈粉红色为没有活性。　　通常10分钟以上不显粉红色或红色的大豆制品，其尿素酶活性即可认为合格　　血、尿淀粉酶检测的临床意义　　贾思公　　淀粉酶(AMY或AMS)全称是1，4-α-D-葡聚糖水解酶，催化淀粉及糖原水解，生成葡萄糖、麦芽糖及含有α1，6-糖苷键支链的糊精。淀粉酶主要由胰腺和唾液腺分泌，肺、肝、甲状腺、脂肪等组织亦含有此酶。　　生理变异：成年人血中淀粉酶与性别、年龄、进食关系不大，新生儿淀粉酶缺乏，满月后才出现此酶，逐步升高，约在5岁时达到成年人水平，老年人淀粉酶开始下降，约低25%。　　注意事项：血淀粉酶的检验结果与进食的关系并不大，因此检验前无需刻意空腹，但若有使用避孕药或者麻醉药等则可能使得测定的数值出现偏低的情况。　　参考值：血清淀粉酶28—100u/L；尿液淀粉酶0—500u/L　　临床意义：淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌，可通过肾小球滤过。　　(1)血