拟干酪乳杆菌发酵L乳酸合成培养基的优化.pdfVIP

第９卷第５期 生　物　加　工　过　程 Ｖｏｌ．９Ｎｏ．５ ２０１１年９月 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｐｒｏｃｅｓｓＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｓｅｐ．２０１１ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－３６７８．２０１１．０５．００７ 拟干酪乳杆菌发酵Ｌ 乳酸合成培养基的优化 张　悦，王泽建，王永红，钱江潮，张嗣良 （华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室，２００２３７） 摘　要：为开发一种适合于乳酸发酵过程代谢流分析（ＭＦＡ）的合成培养基，以拟干酪乳杆菌Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐａｒａｃａｓｅｉ 为对象，考察主要营养成分对其生长和乳酸合成的影响。在合成培养基的优化过程中，先确定了影响菌体生长和 乳酸合成的主要营养物质及其浓度范围，针对葡萄糖、混合氨基酸、核苷类物质、维生素等生长因子、混合磷源、 ＣａＣＯ六大类营养成分，使用正交试验法先后设计了六因素五水平和四因素三水平正交试验以及氨基酸梯度试验 ３ 和氨基酸缺失试验，得到了最佳培养基组成（１Ｌ）：葡萄糖８０ｇ、醋酸钠２ｇ、吐温－８０１ｍＬ、柠檬酸氢二铵１ｇ、金属 离子０７２ｇ、混合氨基酸３９２５ｇ、核苷类物质０１５ｇ、维生素等生长因子００７５ｇ、混合磷源０ｇ、ＣａＣＯ３５ｇ。以半 ３ 合成培养基为对照，考察优化后的合成培养基对菌体生长和乳酸合成的影响。结果表明，菌体在合成培养基中的 乳酸产量、产率均比半合成培养基中高。这些结果为Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ的代谢流定量研究奠定了基础。 关键词：合成培养基；乳酸；拟干酪乳杆菌；正交试验 中图分类号：Ｑ８１５　　　　文献标志码：Ａ　　　　文章编号：１６７２－３６７８（２０１１）０５－００３２－０６ ＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｄｅｆｉｎｅｄｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍｆｏｒＬｌａｃｔｉｃａｃｉｄ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｂｙＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐａｒａｃａｓｅｉ ＺＨＡＮＧＹｕｅ，ＷＡＮＧＺｅｊｉａｎ，ＷＡＮＧＹｏｎｇｈｏｎｇ，ＱＩＡＮＪｉａｎｇｃｈａｏ，ＺＨＡＮＧＳｉｌｉａｎｇ （ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＢｉｏｒｅａｃｔｏｒＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＥａｓｔＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００２３７，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｄｅｖｅｌｏｐａｄｅｆｉｎｅｄｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍｆｏｒＭＦＡ，ｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｐｒｉｍｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｔｏ ｔｈｅｇｒｏｗｔｈａｎｄｌａｃｔａｔｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｎＬ．ｐａｒａｃａｓｅｉｗａｓｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｆｏｒｔｈｅｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｄｅｆｉｎｅｄｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ，ｔｈｅｐｒｉｍｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｔｈｅｍｅｄｉｕｍａｎｄｔｈｅｒａｎｇｅｓｏｆｔｈｅｉｒｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ． Ｔｈｅｎ，ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ６ｋｉｎｄｓｏｆｎｕｔｒｉｅｎｔｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｇｌｕｃｏｓｅ，ａｍｉｎｏａｃｉｄｍｉｘｔｕｒｅ，ｎｕｃｌｅｏ ｓｉｄｅｓ，ｖｉｔａｍｉｎｓａｎｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｓ，ｐｈｏｓｐｈａｔｅｍｉｘｔｕｒｅ，ａｎｄｃａｌｃｉｕｍｃａｒｂｏｎａｔｅ，ｗａｓｄｅｆｉｎｅｄｔｈｒｏｕｇｈａｓｉｘ ｆａｃｔｏｒｆｉｖｅｌｅｖｅｌｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｎｄａｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｆｏｕｒｆａｃｔｏｒｔｈｒｅｅｌｅｖｅｌｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ａｓ ｗｅｌｌａｓａｍｉｎｏａｃｉｄｍｉｘｔｕｒｅｇｒａｄａｔｉｏｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｎｄａｍｉｎｏａｃｉｄｓｈｏｒｔａｇｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｔｈｅｆｉｎａｌｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｃｏｍｐ