麻黄水提液体外抗RSV实验研究-临床检验诊断学专业毕业论文.docxVIP

硕士学位论文 硕士学位论文 中文摘要 摘要 目的： 探讨麻黄水提液在体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用及其作 用机制，为治疗呼吸道合胞病毒感染寻找新型药物。 方法： 1、将中药麻黄加水熬制，采用负压抽滤后合并滤液，用减压蒸 发的方法浓缩制成水提液。 2、采用体外细胞培养技术，通过目测法和MTT法检测麻黄水提 液对Hela细胞的毒性。 3、以利巴韦林为阳性对照，对麻黄水提液进行体外抗RSV的药 效学检测。用空斑减数实验测得麻黄和利巴韦林抑制RSV的半数有 效剂量。用细胞病变抑制实验检测麻黄水提液对RSV的吸附与穿入 的抑制作用以及其对RSV的直接抑制作用。用空斑减数实验检测麻 黄水提液在不同浓度不同时间对RSV的抑制作用。 结果： 1、麻黄水提液对Hela细胞的半数中毒浓度(CC50)目测法为12．58 mg／ml， MTT法结果为12．21 mg／ml，利巴韦林对Hela细胞的CC50 目测法为O．42 mg／ml，MTT法为0．44 mg／ml。麻黄水提液对RSV的 半数有效剂量(EC50)为3．74mg／ml， 选择系数(SI)为3．26，利巴 韦林EC50为35．66 1．t g／ml，SI为12．34。 2、麻黄水提液和利巴韦林对RSV吸附到Hela细胞上的过程和 硕士学位论文 硕士学位论文 中文摘要 穿入细胞膜的过程均有明显的抑制作用(P0．01)；麻黄水提液对 RSV还有直接抑制作用(PO．05)；5．00mg／ml、4．00mg／ml、3．20 mg／ml、 2．56 mg／ml麻黄水提液4个剂量组在RSV感染后8小时内给药均能 抑制RSV(Po．05)；各浓度间，相同浓度不同时间给药对病毒的抑 制均有差异(PO．05)，时间和浓度两个因素之间存在交互作用。浓 度越高，用药时间越早，抑制RSV的作用越大；浓度越低，用药时 间越晚，对RSV的抑制作用越小。利巴韦林在8小时内给药也对RSV 有抑制作用。 结论： 1、5．00mg／ml麻黄水提液能阻止RSV对细胞的吸附，也能抑制 RSV对细胞膜的穿透。 2、麻黄水提液2．5mg／ml时就对RSV有直接抑制作用。 3、麻黄水提液5．00mg／ml、4．00mg／ml、3．20 mg／ml、2．56 mg／ml 4个剂量组在感染8小时内给药均能抑制RSV，而且对RSV的抑制 作用有明显的量效、时相关系。 4、麻黄水提液在体外具有明显的抑制RSV作用。 关键词麻黄水提液；体外实验；Hela细胞；呼吸道合胞病毒(RSV) II 硕士学位论文 硕士学位论文 英文摘要 ABSTRACT objective 1、 In order to find the new drug for respiratory syncytial virus(RSV)infection treatment，we study the effect and mechanism of anti-respiratory syncytial virus of the water extract of Ephedra Sinica． Methods： 1、We decoct the Chinese medicine Ephedra Sinica by adding water, then drainaging and filtering it under the negative pressure before we collect the filtrate．Wb concentrate the medicial solution and make it into Ephedra Sinica water extract using the method of vacuum evaporation． 2、The cytotoxicity of Ephedra Sinica water extract was tested by MTT assay and visual observation using the method of cell culture in vitro． 3、Antiviral activity of the Ephed