慢性应激刺激对成年小鼠认知功能的影响及丰富环境的保护性研究-神经病学专业毕业论文.docxVIP

河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。 本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。 河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学 位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材 料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有否则一．沁、。 承担相应的法律责任。 ～√．、．智、嚏 研究生签名：靠压乙精师签名恐譬轳学院领导主耋：≥乏豢i‘萼 立钟3 7t对咱jj一一i：一，‘／ 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了 文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写， 文责自负。 研窄生签名．≯础气导师签名：剖{§护 矽年?’月钮日 中文摘要慢性应激刺激对成年小鼠认知功能的影晌及丰富环 中文摘要 慢性应激刺激对成年小鼠认知功能的影晌及丰富环 境的保护性研究 摘 要 目的：通过给予成年雄性小鼠慢性不良应激刺激建立成 年小鼠认知功能障碍模型，并给予丰富环境干预治疗，观察 小鼠成年期及老年期鲶行隽学、海马各区神经纤维末端突触 素及神经元胞浆内尼氏小体的变化。依此评估慢性不良应激 刺激对小鼠认知功能的近期及远期影响，以及丰富环境干预 对认知功能障碍的预防保护作用，并对其可能的作用机制进 行探讨，期望发现AD的可能病因以及预防AD的新措施。 方法：健康成年≤8蜀龄)雄性昆明种小鼠48只，随杭 分为慢性应激组(Stress，S组)，慢性应激+丰富环境缝 (Stress+Enriched environment，SE组)及对照组。履依据标 本采集时间不同将上述各组小鼠又分为成年组小鼠及老年 组小鼠。S组小鼠接受慢性束缚露|j激6周，s琶组小鼠在接受 慢性束缚刺激的同时给予丰富环境干预6周。6周结束后成 年组小鼠接受水迷宫行为学测试，评价其学习、记忆能力； 之后快速断头处死，剥离大脑，脑组织石蜡包埋，切片，SP 法行突触素免疫组织化学染色，光镜下观察海马CAl、CA3 区及齿状回脑组织突触素的变化，并利用医学图像分析系统 分析上述脑区突触索阳性细胞数量，取得免疫阳性细胞评分 (Immunes Histochemistry Positive Cell Score，IHS)值；采 用硫堇染色方法观察海马CAl、CA3区及齿状回神经元胞浆 内尼氏小体的变化。老年期小鼠6周干预治疗后即在普通环 中文摘要境下继续饲养ll周至老年期(共25周龄)，后以上述同样 中文摘要 境下继续饲养ll周至老年期(共25周龄)，后以上述同样 的方法进行行为学及病理学检测。所得实验数据均以X±S 表示，利用SPSS 1 0．0统计软件进行统计学分析。 结果：1．成年小鼠检测结果：水迷宫检测法显示，S组 小鼠学习、记忆成绩分别为93．00士35．06秒、75．25+34．35秒， 较SE组及对照组小鼠明显下降(SE组小鼠学习记忆成绩分 别为20。44+3．88秒、22．22+7。82秒，对照组小鼠学习记忆成 绩分别为19．00-J：2。22秒、20．00-a：5．07秒)，差别有统计学意义 (S组小鼠与SE组及对照组小鼠比较P值均为0)；病理结 果显示S组小鼠海马CAl、CA3区及齿状回脑组织突触素阳 性细胞数显著减少，相应的IHS值为0．51+0．02，明显低于 SE组及对照组小鼠突触素阳性细胞数(SE组及对照组小鼠 IHS值分别为2．16：1=0．07、2．03+0．34)，差别有统计学意义(S 组小鼠与SE组小鼠及对照组小鼠比较P值均为0)，说明S 组小鼠海马神经纤维末端突触结构受损；尼氏小体染色显 示，与SE组及对照组小鼠比较，S组小鼠海马CAl、CA3 区及齿状回神经元胞浆内蓝色颗粒数量减少，染色较浅，说 明其海马区神经元功能受损。而SE组与对照组小鼠比较， 小鼠行为学、突触素免疫组化染色及尼氏小体数量两组间均 无显著差别。2．老年小鼠检测结果：S组小鼠学习记忆能力 较SE组及对照组明显下降，其学习、记忆成绩分别为 49．86-4-26。35秒、44．00-a：11。60秒，与相应的SE组小鼠(SE 组小鼠学习记忆成绩分别为9．43+2。07秒、9。14圭1．07秒)比 较P值均为0，差别有统计学意义，与对照组小鼠(对照组 小鼠学习记忆成绩分别10．88士2．41秒、14．13+7．02秒)比较 P值为0，差别有统计学意义，SE组与对照组小鼠比较P值 中文摘要分别为0．48及o．09大于0．05，差别无统计学意义；突触素 中文摘要 分别为0．48及o．09大于0．05，