灰葡萄孢侵染垫缺失突变体的筛选及其相关生物学特性的.pdfVIP

微生物学通报 Nov. 20, 2015, 42(11): 2151−2158 Microbiology China © 2015 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150067 研究报告 灰葡萄孢侵染垫缺失突变体的筛选及其 相关生物学特性的研究 1 2 1* 1 1 1 汤洁静 范雷 张静 吴明德 杨龙 李国庆 (1. 华中农业大学 农业微生物学国家重点实验室 湖北 武汉 430070) (2. 武汉市武昌区园林局 湖北 武汉 430060) 摘 要：【目的】从农杆菌介导获得的灰葡萄孢RoseBC-3 的突变体库中筛选侵染垫缺失突变体 菌株，并明确其相关生物学特性。【方法】将菌株接种于洋葱表皮，利用棉兰染色观察侵染垫形 成情况，筛选得到一个侵染垫缺失突变体(AT19)。采用形态学方法、离体叶片接种法、钌红染色 法、小麦种子幼芽生长抑制法分别对该菌株的菌落培养性状、侵染垫产生情况、致病力、产果胶 酶能力以及产植物毒性代谢产物能力进行测定。【结果】筛选灰葡萄孢突变体168 株，根据侵染 垫形成可分为三类：快速形成侵染垫型(158 株) 、缓慢形成侵染垫型(9 株)和侵染垫形成缺陷 型(1 株，AT19) 。AT19 在接种洋葱 120 h 后依然无法形成成熟侵染垫。该菌株生长较为缓慢，菌 落扩展均匀，可以产生分生孢子，对烟草、草莓、蚕豆和豌豆叶片均不能致病，可以产生果胶酶 和植物代谢毒性物质。【结论】突变体菌株AT19 可以产生果胶酶和植物代谢毒性物质，其致病 力缺失与侵染垫产生缺陷相关。研究结果为了解灰葡萄孢侵染垫形成分子机制提供基础材料。 关键词：灰葡萄孢，侵染垫，特性 Screening and biological characterization of infection cushion-deficient mutants in Botrytis cinerea TANG Jie-Jing1 FAN Lei2 ZHANG Jing1* WU Ming-De1 YANG Long1 LI Guo-Qing1 (1. Huazhong Agricultural University, State Key Laboratory of Agricultural Microbiology, Wuhan, Hubei 430070, China) (2. Bureau of Horticulture Forestry Science of Wuchang District, Wuhan, Hubei 430060, China) Abstract: [Objective] To screen infection cushion-deficient mutants in Botrytis cinerea strain RoseBC-3 transformed with Agrobacterium tumefaciens. [Methods] Mycelial plugs of B . cinerea were inoculated on onion epidermal strips, which were then incubated for 12 to 120 h, stained with Medan dye and finally examined with a light microscope. Colony morphology,