裸大麦中生育三烯酚的提取及抑制内皮细胞氧化损伤的作用-农产品加工及贮藏工程专业毕业论文.docxVIP

主里垒些兰三兰堕主兰垡兰苎』塑丝上—————————————一中文捅要 主里垒些兰三兰堕主兰垡兰苎』塑丝上—————————————一 中文捅要 生育三烯酚(Tocotrien01)是维生素E(vE)的一类化合物，研究表明生育三烯酚在 抗氧化、降低胆固醇、抑制癌症等方面具有独特的生理功能。目前我国对生育三烯酚的研 究是空白，因此有必要加强这一方面的研究。 本论文以裸大麦为原料。研究与探讨了生育三烯酚的分析检测、提取分离及对超氧阴 离子自由基损伤人脐静脉内皮细胞的防护作用，主要实验结果如下： 建立了一种同时测定裸大麦中a一、口一、J一生育酚和口一、r一、6一生育三烯酚以及 r一生育酚+芦一生育三烯酚含量的正相高效液相色谱法；(采用国产YwG．si02柱(250mm ×4 mm ID，5 p m)为分离柱，rta＆：h目#=99：1体系为流动相，流速为1．2 mUmin， 采用荧光检测器，激发波长290 nm，发射波长330 nm，整个分离过程12 min内完成·在 线性范围(O～20 mg．L-1)内测定结果具有很好的相关性，测定精密度为3．1％～8．2％， 加标回收率为77％～108％。同时测定了西藏自治区具有代表性的6种裸大麦中的生育酚 和生育三烯酚含量。。∥ 探讨了不同生育三烯酚提取方法；f(1)皂化法．正交实验结果表明，在本实验条件下 从裸大麦(5．O g)中提取生育三烯酚的最佳皂化组合为：无水乙醇60 mL、600 g／L KOH 溶液3 mL、抗坏血酸O．5 g、皂化时间45 min。(2)溶剂浸提法。通过溶剂对比实验确定 了从裸大麦中浸提生育三烯酚的适宜溶剂系统，并通过正交实验确定了最佳溶剂浸提工艺 条件．正交实验结果表明，在本实验条件下，从裸大麦中浸提总生育三烯酚的最佳条件为： 混合溶剂(含60％乙酸乙酯+40％正己烷)、液固比10：1、浸提时间2h。(3)微波萃取法。 正交实验结果表明，在本实验条件下采用微波法从裸大麦中提取生育三烯酚的最佳条件为： 混合溶剂(含20％乙醇和80％乙酸乙酯)、萃取时间60秒、液周比15：l。(4)超临界C02 流体萃取法。采用四元二次通用旋转设计实施实验，结果表明：萃取温度对生育三烯酚提 取率有显著影响．乙醇添加量和萃取时阃对生育三烯酚提取率有极显著影响，而萃取压力 对生育三烯酚提取率无显著影响，但萃取压力和乙醇添加量的交互项对生育三烯酚提取率 有显著影响：在本实验条件下．生育三烯酚最佳sFE．c02萃取条件为：萃取温度51．8℃、 萃取压力34．7 Mpa、乙醇添加量9％、萃取时间120 min。。7 以乙醚正己烷混合溶液为淋洗液，探讨了硅胶柱层析和硝酸银硅胶柱层析分离生育三 烯酚和生育酚的效果；漕果表明：通过改变淋洗液中乙醚含量可以将生育酚和生育三烯酚 大部分分离；硝酸银硅胶柱层折分离生育三烯酚和生育酚的效果明显高于硅胶柱层析，其 洗脱液中生育三烯酚可占vE总量的90％以上，最高达98．47％。，7 以人脐静脉内皮细胞(EcV一304)为研究试材，采用细胞培养方法，通过黄嘌呤氧化 酶／黄嘌呤系统反应产生超氧阴离子自由基，研究了超氧阴离子自由基对培养的人脐静脉内 皮细胞(EcV-304)的损伤作用，并在此基础上，研究与比较了d一、卢一、r一、5一生育 三烯酚和a一生育酚对自由基损伤的防护效果。f结果表明，外加a一生育酚、a一、卢一、r一、 6一生育三烯酚能够在一定程度上抑制内皮细咆的氧化损伤，包括影响细胞形态、细胞存活 IU 堡查耋!生童兰塑堂塑堡墼墨塑型塑些!业堕翌垡型型塑堡旦———————一 堡查耋!生童兰塑堂塑堡墼墨塑型塑些!业堕翌垡型型塑堡旦———————一 率、细胞超微结构、DNA片段化、抗氧化酶、蛋白质氧化修饰、细胞内游离钙离子分布等。 从本实验结果来看，在保护内皮细胞氧化损伤方面，a·生育三烯酚的保护能力不次于。‘ 生育酚，而卢一、r一、d一生育三烯酚的保护效果明显不如a-生育酚厂—， 关键词：裸大麦生育三烯酚生育酚提取活性氧人脐静脉内皮细胞‘EcV-304) ±里壅些盔兰苎主兰堡笙皇j兰竖生—————————————一T0cotrienols ±里壅些盔兰苎主兰堡笙皇j兰竖生—————————————一 T0cotrienols are fat。s01uble vitamins belonging t0 the f抽ily ofVitamin E·Recently，studI。5 have indicated that tocotrienols may be bi01蟛cal acthe in柚t{ox{d呲№miting the踟thesis of choleste耐l，aIld reducing c柏ceL There h酗been no report o