硫酸软骨素酶的分离纯化及部分性质.pdfVIP

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2019-05-25 发布于天津
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硫酸软骨素酶的分离纯化及部分性质.pdf

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25 4 ( ) Vol. 25 No . 4 2004 12 Journal of Jishou University ( Natural Science Edit ion) Dec. 2004 1007- 2985( 2004) 04- 0044 - 05 1 1, 2 1, 2 1 陶科, 龙章富 , 刘昆 , 陶勇 , 1 1 1 1, 2 金虹, 冉红艳 , 高庆, 刘世贵 ( 1. , 610064 ; 2 . , 610064) 通过细胞破碎硫酸铵分级沉淀DEAE- Sepharose FF 和Sephacryl S- 200 层析, 首次从粘质沙雷氏菌中提取出硫酸软骨素酶. 纯化倍数 11. 46, 比活为81. 23 U / mg 蛋白. 提取液经PAGE 和SDS- PAGE 检测, 呈现一条带. 该酶相对分子质量为71. 2 KD, 亚基分子质量为35 KD, 该酶为2 个相同亚基组成. 等电点为7. 19 , 最适pH 值7. 5 , 最适温度为40 , 以4- 硫酸软骨素为底物测得Km 值为3. 98 10- 4 mol/ L. 沙雷氏菌; 硫酸软骨素酶; 分离纯化 Q814. 4 A ( chondrot inase, chondrotin sulfate lyase) , , . . [ 1] [ 2] , , [ 3] [ 4] . , , , , [ 5] [ 6] , , , , . , . , 2~ 10 KD , . , . ( Proteus vulg aris ) [ 7] , ( Flav obacterium hep arinum ) [ 8] , ( Proteus mirabilis) [ 9] . , ( Bacteroides thetaiotaomi cron) [ 10] , ( Bacteroides stercoris ) [ 11] . , , . ( Serratia marcescens ) GT596, , , . 1 1. 1 ( Serratia marcescens ) GT596, GenBank AY732377, . 2004 - 11- 15 ( 1978- ) , , , . 4 , 45 DEAE- Sepharose FF, Sephacryl S- 200, Pharmacia ; Amphaline( pH 3. 5~ 10, 6 ~ 8) LKB ; FLUKA ; ; 4- . 1. 2 1. 2 . 1 8 000 r/ min , 0 , 10 min , 3 , 3 0. 02 mol/ L, pH 7 Tris- HCl , , 9 min ( 60 , 9 s) , 0 , 17 500 g 30 min, . 0. 3~ 0