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第一篇 专题十 现代生物科技专题;直击考纲
1.基因工程的诞生(Ⅰ)。 2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ)。
3.基因工程的应用(Ⅱ)。 4.蛋白质工程(Ⅰ)。
5.植物的组织培养(Ⅱ)。 6.动物细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ)。
7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。
8.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础(Ⅰ)。
9.胚胎干细胞的移植(Ⅰ)。 10.胚胎工程的应用(Ⅱ)。
11.转基因生物的安全性(Ⅰ)。 12.生物武器对人类的威胁(Ⅰ)。
13.生物技术中的伦理问题(Ⅰ)。 14.简述生态工程的原理(Ⅱ)。
15.生态工程的实例(Ⅰ)。;静悟提纲;;1.基因工程常考的3种基本工具
(1)限制性核酸内切酶:识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并在特定位点上切割DNA分子。
(2)DNA连接酶:①E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端;②T4 DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。
(3)载体:①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制;②有一个至多个限制酶切割位点,供外源DNA片段(基因)插入其中;③具有特殊的标记基因——以便对含目的基因的受体细胞进行鉴定和选择。;2.基因工程的4大操作程序
(1)目的基因的获取
①从基因文库中获取。
②利用PCR技术扩增
a.原理:DNA双链复制。
b.条件:模板DNA、引物、游离的脱氧核苷酸、热稳定的DNA聚合酶。;(2)基因表达载体的构建
①基因表达载体模式图;②基因表达载体的构建过程;(3)将目的基因导入受体细胞
①导入植物细胞:农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。
②导入动物细胞:显微注射技术。
③导入微生物细胞:感受态细胞法(用Ca2+处理)。
(4)目的基因的检测与鉴定
①插入检测:DNA分子杂交技术。
②转录检测:DNA—RNA分子杂交技术。
③翻译检测:抗原—抗体杂交。
④个体水平检测:抗性接种实验。;3.图解记忆蛋白质工程;4.比较记忆植物组织培养与动物细胞培养;结果;5.植物体细胞杂交与单克隆抗体制备过程比较;(1)诱导融合的方法分别有哪些?融合的细胞类型有哪几种(仅考虑两两融合的细胞)?
提示 ①诱导植物体细胞的原生质体融合的方法主要有离心、振动、电激或用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。
②动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭??的病毒(诱导动物细胞融合的特有因素)、电激等。
融合的细胞类型:前者—AA、BB、AB。后者—瘤瘤、B瘤、BB。;(2)各自的原理分别有哪些?
提示 前者有细胞膜的流动性和植物细胞的全能性,后者有细胞膜的流动性和细胞增殖。;6.掌握克隆动物培育的流程;7.理清单克隆抗体制备的过程;题组一 基因工程和蛋白质工程;(2)将α1-抗胰蛋白酶基因与乳腺蛋白基因的________________________等调控组件重组在一起,构建基因表达载体,然后通过__________技术,导入羊的受精卵中。;(3)受精卵通过早期胚胎培养,一般发育到_____________阶段,通过胚胎移植到受体子宫中孕育,为选育出能泌乳的雌羊,移植前须从胚胎的________部位取样,做DNA分析鉴定性别。;(4)α1-抗胰蛋白酶是一种结构较复杂的糖蛋白,因此用上述方法生产,相对传统的转基因大肠杆菌生产,优势在于___________________________
_______________________。;1;(1)要将人乳铁蛋白基因插入质粒,若只允许使用一种限制酶,应选择的限制酶是________,酶能起催化作用的原理是_______________________
_______。;解析 分析题图:题图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的过程,该过程采用了基因工程技术(目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达)、动物细胞培养技术、早期胚胎培养和胚胎移植技术。图中①表示将目的基因导入受体细胞;②表示早期胚胎培养;③表示胚胎移植;④表示转基因牛的产生;⑤表示从转基因牛中获取目的基因产物。
根据表中五种酶的识别序列及切割位点可知,限制酶Sau3AⅠ还可以切割限制酶BclⅠ和限制酶BamHⅠ的识别序列,因此要将人乳蛋白基因插入载体,在只允许用一种限制酶切割载体和人乳铁蛋白基因的情况下,应选择限制酶Sau3AⅠ。酶能起催化作用的原理是可以显著降低化学反应的活化能。;(2)据图分析,筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含____________
(填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”)的培养基上进行,原因是___________________________________________________
______________________________________
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