黄芪对同种移植受体糖皮质激素受体和皮质醇的影响及意义-影像医学与核医学专业毕业论文.docxVIP

目 目 录 中文摘要 ·1 英文摘要 “3 符号说明 ”6 论文正文 一8 前言刖舌 ～～8 材料与方法 l 3 实验材料 l 3 1．建立小鼠同种皮肤移植模型的材料 ·13 2．制备脾细胞悬液的材料 13 3．GR测定的材料 1 4 4．提取组织总RNA的材料 14 5．RT反应材料 1 5 6．PCR反应材料 1 5 7．DNA电泳材料 ·l 6 8．血清皮质醇测定 16 9．GC一91l放射免疫计数器 16 10．实验过程中所用药物 ·16 实验方法 l 6 1．制备小鼠同种皮肤移植模型 16 2．制备脾细胞悬液 2．制备脾细胞悬液 17 3．测定脾细胞GR位点数 一17 3．1饱和曲线的制备 ·1 7 3．2样本测量一单点法 一l 8 3．3复合物与游离配基的分离 18 3．4 GR测定 ”1 8 4 TRIzol一步法提取细胞的总RNA 18 5 RT-PCR反J立 ·1 9 5．2 PCR l 9 5．3琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 20 6测定血清皮质醇 20 7实验动物分组 ·2l 7．1黄芪不同剂量研究分组 21 7．2不同处理方式研究分组 2 1 8统计学处理 ·22 实验结果 22 1．AMI对同种移植皮片生存期的影响 一22 1．1不同浓度AMI对同种移植物生存的影响 22 1．2不同处理组对同种移植物生存时间的影响 22 2 移植受体糖皮质激素受体的变化 22 2．1移植受体脾细胞糖皮质激素受体的饱和曲线 22 2．2移植后不同时间受体脾细胞GR结合位点数的动态变化 2．2移植后不同时间受体脾细胞GR结合位点数的动态变化 “23 2．3 AMI体内应用对排斥高峰期受体脾细胞GR结合位点数的影响 ”23 2．4 AMI体内应用对排斥高峰期受体脾细胞GRmRNA表达的影响 “23 3 同种移植后受体小鼠血清皮质醇的改变 24 3．1同种移植后受体小鼠血清皮质醇动态变化 24 3．2 AMl对移植后第14天血清皮质醇的影响 ”24 讨 论 ·25 结 论 ·30 附图表 3 l 参考文献 37 致 谢 45 攻读学位期间发表的学术论文目录 46 CATALOGUEChinese CATALOGUE Chinese Abstract ·l English Abstract ··3 Symbol Introduction ·6 Main bodv ”8 Preface ·8 Materials and Methods ·1 3 Experimental material 1 3 1．Using in murine allotransplantation model ”1 3 2．Using in spleen cell suspension making ‘1 3 3．Using in me删emem of GR amount 。1 4 4．Mmerials of extraction total RNA ·l 4 5．Materials of IU’reaction ·l 5 6．Materials of PCR reaction ·1 5 7．Materials of DNA electrophoresis ·1 6 8．Materials ofmeasuring serum cortisol 16 9．GC．911 Instrument 16 1 0．Drugs used during the experiments 1 6 Experimental methods ··1 6 1．Establishing murine allotransplantation model ．．1 6 2．Establishing 2．Establishing spleen cell suspension ．．17 3．Measuring the amount ofGR ofrecipient’S spleen cells 17 3．1 Multi—point method ·1 7 3．2 Single-point method ¨1 8 3．3 Separating complex and free ligands ·18 3．4 Measuring the amount ofGR 18 4 TRIzol one-step extraction oftotal RNA 1 8 5．R．r．PCR reaction ·19 5．1 Reverse Transcription 19 5．2 Polymerase Chmn Reaction 1 9 5．3 Agarose gel electrophoresis ofPCR product · · - - · · ·20 6．Measuring serum corti