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2011 年第10 期
中 国 酿 造
总第235 期 · ·
研究报告 33
重组毕赤酵母产凝乳酶发酵条件研究
1 1，2 2 1，2
张 健，张 莉 ，李玉秋，杨贞耐 *
（1.吉林大学生物与农业工程学院，吉林 长春 130022；2. 国家乳品加工技术研发分中心，
吉林省农业科学院农产品加工研究中心，吉林 长春 130033）
摘 要：以重组毕赤酵母GS115/pPICZaA-Prochy为凝乳酶生产菌种，研究其在5L发酵罐水平的最佳产酶条件，为中试生产提供依据。
采用批量发酵，甲醇浓度0.1% ，诱导阶段每12h添加10g/L蛋白胨，发酵液pH值为3.0，油酸浓度0.2% ，诱导初期批量加入10g/L山梨醇
共基培养，诱导84h可获得152SU/mL的酶活力。采用十二烷基磺酸钠-苯琼脂糖凝胶电泳分析，在发酵液（去菌体后）样品盐离子浓度
2mol/L，流速2.5mL/min ，酶回收率达到82%，浓缩倍数20倍。
关 键 词：凝乳酶；毕赤酵母；发酵条件；纯化
中图分类号：TQ925 文献标识码：A 文章编号：0254-5071 （2011）10-0033-05
Fermentation conditions of chymosin by recombinant Pichia pastoris
1 1，2 2 1，2
ZHANG Jian , ZHANG Li , LI Yuqiu , YANG Zhennai *
( 1.School of Biological and Agricultural Engineering, Jilin University, Changchun 130022, China; 2.National RD Center for
Milk Processing, Center of Agro-Food Technology of Jilin Academy of Agricultural Sciences, Changchun 130033, China)
Abstract: The optimal conditions for producing chymosin in 5L fermenter by recombinant Pichia pastoris Gs115/pPICZaA-Prochy were determined
in order to offer technical bases for pilot scale production. After induction for 84h, the highest enzyme activity (152SU/ml) was achieved with batch
culture, in which, 10g/L
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