第二章微生物发酵产酶终稿.pptVIP

2.控制阻遏物的浓度：无机磷是碱性磷酸酶的阻遏物 3.添加表面活性剂：增加细胞的通透性 4.添加产酶促进剂：聚乙烯醇提高糖化酶的产量机理尚不清楚 * * * * 酵母是一群属于真菌的单细 胞微生物。它分为两大类: 一类能产生子囊孢子，称为 真酵母；另一类不能生成子 囊孢子，称为类酵母。通常 以出芽方式进行无性繁殖， 也有少数酵母进行有性繁殖。 细胞形状因菌株而异，有球 形、卵园形、柠檬形、梨形、 腊肠形、也有丝状。大小一 般为1～30μm。 四、酵母 啤酒酵母除了主要用于啤酒、酒类的生产外，还可以用于转化酶、丙酮酸脱羧酶、醇脱氢酶等的生产。 假丝酵母可以用于生产脂肪酶、尿酸酶、尿囊素酶、转化酶、醇脱氢酶等。具有较强的17-羟基化酶，可以用于甾体转化。 第三节 发酵工艺条件及控制 保藏细胞 细胞活化 细胞扩大培养 发酵 分离纯化 酶 原生质体 培养基 固定化原生质体 固定化细胞 预培养 无菌空气 一、细胞活化与扩大培养 细胞活化：保藏细胞在使用之前必须接种于新鲜的斜面培养基上，在一定条件下进行培养，以恢复细胞的生命活力，这就叫细胞的活化。 种子培养基：用于细胞扩大培养的培养基。 氮源丰富 碳源少 温度、pH、溶解氧 接种量：1~10% 二、培养基的配制 培养基：是指人工配制的用于细胞培养和发酵的各种营养物质的混合物。 水 碳源 氮源 无机盐 生长因素 碳是构成细胞的主要元素之一，也是所有酶的重要组成元素。 碳源可作能源，为生命活动提供能量 不同微生物对碳源的利用有所不同，在酶发酵生产中还要注意某些碳源对酶生物合成具有代谢调节作用（诱导和阻遏） 常用碳源：糖类、醇类、脂类、有机酸、烃类、蛋白质及其降解物 水是微生物最基本的组成分（７０％—９０％） 水是微生物体内和体外的溶剂（吸收营养成分和代谢废物） 水是细胞质组分，直接参与各种代谢活动 调节细胞温度和保持环境温度的稳定（比热高，传热快） 水 碳源 选择合适碳源，以适应目的酶的合成调节机制 构成细胞物质和代谢产物中氮素（不能用作能源 ） 氮源 有机氮源 蛋白胨、酵母膏、牛肉膏 无机氮源 铵盐、硝酸盐 参与酶的组成、构成酶活性基、激活酶活性 维持细胞结构的稳定性 调节细胞渗透压 控制细胞的氧化还原电位 有时可作某些微生物生长的能源物质 常用：硫酸盐、磷酸盐、氯化物以及含有钾、钠、钙、镁、铁等元素的化合物。 氮源 无机盐 需要注意合适的碳氮比 生长因子 生长因子是指某些微生物不能用普通的碳源、氮源物质进行合成，而必须另外加入少量的生长需求的有机物质。 分类： 化学结构分成维生素、氨基酸、嘌呤（或嘧啶）及其衍生物和类脂成分 等四类 功能：以辅酶与辅基的形式参与代谢中的酶促反应 实验室中常用酵母膏、蛋白胨、牛肉膏等作为各种生长因子的需要，麦芽汁、米曲汁等天然培养基中本身含有各种生长因子 培养基 各种生物对营养的需求 1、选择适宜的营养物质 2、营养物的浓度及配比合适 3、物理、化学条件适宜 4、经济节约 5、精心设计、试验比较 培养不同的微生物必须采用不同的培养条件； 培养目的不同，原料的选择和配比不同； 不同阶段，培养条件也有所差异。 培养基的设计原则 实验室的常用培养基： 细菌： 牛肉膏蛋白胨培养基（或简称普通肉汤培养基）； 放线菌：高氏1号合成培养基培养； 酵母菌：麦芽汁培养基； 霉菌： 查氏合成培养基； 例如枯草芽孢杆菌： 一般培养：肉汤培养基或LB培养基； 自然转化：基础培养基； 观察芽孢：生孢子培养基； 产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基； 枯草杆菌BF7658α-淀粉酶发酵培养基：玉米粉8%，豆饼粉4%，磷酸氢二钠 0.8%，硫酸铵0.4%，氯化钙0.2%，氯化按0.15%（自然pH）。 枯草杆菌AS1.398中性蛋白酶发酵培养基：玉米粉4%，豆饼粉3%，麸皮3.2%, 糠1%, 磷酸氢二钠0.4%, 磷酸二氢钾0.03%（自然pH）。 黑曲霉糖化酶发酵培养基：玉米粉10%，豆饼粉4%，麸皮1%（pH4.4～5.0）。 地衣芽孢杆菌2709碱性蛋白酶发酵培养基：玉米粉5.5%, 豆饼4%, 磷酸氢二钠0.4%, 磷酸二氢钾0.03%(pH 8.5)。 黑曲霉AS 3.350酸性蛋白酶发酵培养基: 玉米粉6%, 豆饼粉4%, 玉米浆0.6%, 氯化钙0.5%, 氯化铵1%, 磷酸氢二钠0.2% (pH 5.5)。 游动放线菌葡萄糖异构酶发酵培养基：糖蜜2%，豆饼粉2%，磷酸氢二钠0。1%，硫酸镁0。05% (pH 7.2)。 桔青霉磷酸二酯酶发酵培养基：淀粉水解糖5%，蛋白胨0.5%, 硫酸镁0.05%, 氯化钙0.04%, 磷酸氢二钠0.05%, 磷酸二氢钾0.05% (自然pH)。 黑曲霉AS3.396果胶酶发酵培