罗格列酮逆转人胃癌裸鼠移植瘤对丝裂霉素耐药的作用及机制-消化内科专业毕业论文.docx

目 录 中文摘要1 英文摘要3 正文6 前言6 材料与方法8 结果18 讨论37 结论 42 参考文献43 主要缩略英文索引49 综述51 读研究生期间发表的论文60 致谢61 II PAGE PAGE 10 罗格列酮逆转人胃癌祼鼠移植瘤对丝裂霉素耐药的作用及机制 硕士研究生：廖 文 秋 导 师：张 琍 中 文 摘 要 目的 观察PPARγ激动剂罗格列酮（ROS）能否逆转人胃癌SGC7901/VCR细胞裸鼠移植 瘤对丝裂霉素(MMC)的耐药作用，初步探讨ROS在体内逆转人胃癌SGC7901/VCR细胞 多药耐药相关的可能机制。 方法 将人胃癌SGC7901/VCR细胞收集后接种于裸鼠背部皮下，观察移植后裸鼠的成瘤 情况，筛选成瘤的裸鼠。术后两周将成瘤的裸鼠随机分为六组：空白对照组生理盐水 0.2ml.2d-1（A组）、丝裂霉素2.5mg.kg-1.2d-1组（B组）、罗格列酮100mg.kg-1.2d-1组（C 组 ）、 罗 格 列 酮 50mg.kg-1.2d-1+ 丝 裂 霉 素 2.5mg.kg-1.2d-1 （ D 组 ）、 罗 格 列 酮 100mg.kg-1.2d-1+丝裂霉素2.5mg.kg-1.2d-1 （E组）、环孢霉素50mg.kg-1.2d-1+丝裂霉素 2.5mg.kg-1.2d-1（F组）。每组8只裸鼠；待移植瘤长至大小约100mm3时开始分别给每组 裸鼠灌胃给药（均为每两日一次），其中丝裂霉素腹腔注射给药，生理盐水、罗格列 酮、环孢霉素灌胃。每隔5日分别测量每只裸鼠移植瘤的大小并给裸鼠称重，并据此 绘制移植瘤的生长曲线；第40天后处死荷瘤裸鼠，检测各组移植瘤的大小、重量，计 算抑瘤率；HE染色观察移植瘤的组织形态；Real -Time PCR检测MDR1、MRP、Livin、 MGr1-Ag mRNA表达；免疫组化和Western-blot检测P-gp、MRP、MGr1-Ag蛋白的表达。 结果 1、裸鼠体重：处死前各组裸鼠体重差别无统计学意义（P0.05）； 2、用药后对移植瘤体积的影响：A 组、B 组移植瘤瘤体积差别无统计学意义 （P0.05），C 组、D 组、E 组、F 组与 A 组、B 组比较移植瘤瘤体积差别有统计学意 义（P0.05），以 E 组、F 组移植瘤瘤体积最小； 3、用药后对移植瘤组织MDR1、MRP、Livin、MGr1-Ag mRNA表达的影响： A 组、B组MDR1、MGr1-Ag mRNA表达最强，C组、D组、E组、F组与A组和B组比较 差异有统计学意义（P0.05），E组、F组表达最少，组间差异无统计学意义（P0.05）； MRP mRNA以B组最高，A组、C组、D组与B组比较差异无统计学意义（P0.05），E 组、F组依次减少、差别有统计学意义（P0.05）；Livin mRNA A组与B组比较差异无 显著性（P0.05），C组、D组、E组、F组与A组、B组比较差别有统计学意义（P0.05）； 4、用药后对移植瘤组织P-gp、MRP、MGr1-Ag蛋白表达的影响： A组、B组P-gp、 MGr1-Ag蛋白表达最强，C组、D组、E组、F组与A组和B组比较差异有显著性（P0.05）， E组、F组表达最少，组间差异无统计学意义（P0.05）； MRP以B组最高，A组、C 组、D组与B组比较差异无统计学意义（P0.05），E组、F组依次减少、差别有统计 学意义（P0.05）。 结论 1、罗格列酮可抑制人胃癌SGC7901/VCR细胞祼鼠移植瘤瘤体生长； 2、罗格列酮可部分逆转人胃癌SGC7901/VCR细胞祼鼠移植瘤对丝裂霉素的耐 药性； 3、罗格列酮在体内部分逆转 SGC7901/VCR 细胞祼鼠移植瘤多药耐药的重要机 制可能是通过下调 MDR1、MGr1-Ag 基因及其编码的蛋白和 Livin 基因在裸鼠移植瘤 组织中的表达。 关键词 PPARγ，罗格列酮，多药耐药，SGC7901/VCR细胞株 Reversing of the resistance to Mitomycin and its mechanism in Nude Mice xenografts of human Gastric Carcinoma by Rosiglitazone ABSTRCT Objectives To explore whether Rosiglitazone(ROS),a selective Peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ) ligand, can reverse the resistance to Mitomycin (MMC) of human gastric cancer SGC7901/V