苗药头花蓼抗菌物质基础研究-药剂学专业毕业论文.docx

贵阳医学院 贵阳医学院 2012 届硕士研究生学位论文 ii ii 2.2.3 实验部分 29 2.2.4 结果与讨论 30 2.3 本部分小结54 第三部分 论文小结 55 参考文献57 英文摘要61 致 谢60 缩略词表64 学位论文独创性声明 65 附 图66 附: 综述 97 1 1 苗药头花蓼抗菌物质基础研究 专业：药剂学，研究生：张丽娟，导师：李勇军教授 王永林教授 王爱民教授 摘要 目的：明确头花蓼的抗菌有效组分及其物质基础。方法：通过考察不同溶 剂提取率，不同提取方法的指纹图谱差异及抗菌活性差异来确定药材的提取方 法，通过水提醇沉和各种柱色谱分离手段，获得头花蓼富含多糖和蛋白质组分、 富含三萜和甾体组分、富含没食子酸类组分、富含黄酮组分以及富含鞣质组分； 以泌尿系统感染常见菌为体外抗菌活性评价模型，筛选出头花蓼抗菌有效组分； 应用各种现代色谱分离手段对筛选出的头花蓼有效组分进行分离、纯化，根据化 合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构，并运用先进的 UPLC/PDA/MS/MS 技术 对未分到单体的色谱峰进行质谱分析，明确有效部位的化学成分。结果：除了富 含多糖和蛋白组分外，头花蓼其余各组分对各种泌尿系统感染常见菌均有不同程 度的抗菌活性。其中，富含黄酮组分和富含鞣质组分的抗菌活性最好。从活性最 强的富含黄酮组分中分离鉴定了 12 个黄酮类化合物（其中有 4 个为酰基黄酮苷）， 1 个其它苷类及 1 个鞣花酸；同时通过液质联用分析明确了该组分中的 36 个主 要色谱峰的结构，包括 24 个黄酮苷（其中有 10 个为酰基黄酮苷），5 个黄酮苷 元，3 个其它苷类及 4 个小分子酸类。结论：富含黄酮组分和富含鞣质组分是头 花蓼的抗菌主要有效组分。在所分离鉴定的化合物中，1-O-β-D-(6′-O-没食子酰 基)-吡喃葡萄糖基-3-甲氧基-5-羟基苯（3），鞣花酸（9），槲皮素-3-O-(3-O-没食 子酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷（23），槲皮素-3-O-(3-O-没食子酰基)-?-L-吡喃鼠李 糖苷（28）4 个化合物为头花蓼中首次分离鉴定，其中化合物 3, 23, 28 为蓼属植 物中首次分离鉴定。在液质联用分析的化合物中，反式对羟基桂皮酸（4），杨梅 素-3-O-己糖苷（6）等 19 个化合物为该种植物中首次报道，其中 1-O-β-D-(6′-O- 没食子酰基)-半乳糖基-3-甲氧基-5-羟基苯（1），槲皮素-3-O-(2-O-原儿茶酰基)- 己糖苷（21），槲皮素-3-O-(2-O-反式对羟基桂皮酰基)-半乳糖苷（25），槲皮素 -3-O-(2-O-原儿茶酰基)-鼠李糖苷（34）4 个化合物为首次报道的新化合物，槲 皮素-3-O-去氧己糖基-4-O-己糖苷（2），sawarachromone（5）等 9 个化合物为蓼 属植物中首次报道的化合物。研究工作初步明确了头花蓼中的主要抗菌物质基 础。 关键词：头花蓼；抗菌活性；药用物质基础 前 言 1.1 抗菌中药研究的意义 感染性疾病严重威胁着人类健康，抗感染药物在控制人类感染性疾病中起 着举足轻重的作用。随着这些药物在临床上的广泛使用，尤其是抗生素的不合理 使用和滥用导致耐药菌株不断增加，现有药物(尤其是抗生素)的效率在逐渐降 低，使人类正面临着“抗菌药物危机”。因此，减少耐药菌株的生成和研制新的 抗菌药物已成为 21 世纪医学界的重要课题。 近年来，人们已开始采用一些新的策略来对付细菌感染[1]。从(动)植物中寻 找天然抗菌物质已取得一些进展[2-3]。研究发现，许多植物提取物与抗菌药物联 用具有很强的协同增效作用[4, 5, 6]，因而在感染性疾病的治疗中得到广泛关注。中 药、民族药常常通过其有效成分多层次、多途径发挥协同作用，在细菌感染性疾 病的治疗中不良反应低、不易产生耐药性，因而受到重视[7]。由中药制成的具有 抗菌作用的单方或复方制剂以及中西药配伍制剂越来越多地应用于临床，显现出 良好的效果。因此，研究和开发抗菌中药对解决耐药菌株的产生和抗生素短缺问 题具有重要意义，且费用低廉[3]。 1.2 头花蓼的研究现状 头花蓼(Polygonum capitatum)又名石莽草、四季红、红酸杆、省丁草，属于 蓼科(Polygonaceae)蓼属(Polygonum)多年生草本植物，主产贵州，是贵州道地药 材[8]，收载于 2003 版《贵州省中药、民族药质量标准》，具有清热解毒、散瘀、 利尿通淋之功效，临床上主要用于泌尿系统感染、泌尿系结石等症的治疗[9-10]。 目前，头花蓼已成为贵州省“六大苗药”和重点培育发展的的品种之一， 以头花蓼为主要原料并被国家标准收载的已有多种药物制剂[11-12]包括泌感灵干 糖浆、热淋清冲剂、热淋清颗粒、热淋毒糖浆、泌淋胶囊、