氯化锂和GDNF对MPTP损伤KM小鼠中脑黑质DA能神经元保护作用的实验分析-神经病学专业毕业论文.docxVIP

Y1011878堡型墨兰堕堡主芏堡笙墨 Y1011878 堡型墨兰堕堡主芏堡笙墨 缩 略 词 表 英文简称 英文全称 中文全称 LiCL LithiUN chloride 氯化锂 CB Calbindin D28k 钙结合蛋白D28k DA Dopami no 多巴胺 GDNF glial cell line—derived neurotrophic 胶质细胞系源性神经 factor 营养因子 6一OHDA 6一hydroxydoDami Re 6一羟多巴胺 PB phosphate buffer 磷酸赫缓冲液 PBS phosphate buffer saline 磷酸盐生理盐水缓冲液 PD Parkinson’S disease 帕金森病 SN substantia nigra 黑质 TH tyrosine hydroxylase 酪氨酸羟化酶 DAB diaminobenzidine 3，3一二氨基联苯胺 H：0： hydrogen peroxi de 过氧化氢 MPTP 1一methyl 4～phenyl～1，2，3，6-tetrahy—drop 1一甲基～4。苯基～】，2，3，6 yridine ～四氢吡啶 CREB cAMP response element binding protein cAMP应答元件结合蛋白 P13一K phosphatidylinosit013-ki nase 磷脂酰肌醇3激酶 徐州医学院硕士学位论文LiCL和GDNF对MPTP损伤I(M小鼠中脑黑质DA能神经 徐州医学院硕士学位论文 LiCL和GDNF对MPTP损伤I(M小鼠中脑黑质DA能神经 元保护作用的实验研究 中文摘要 目的：探讨氯化锂(LithiHm chloride’【，i CI。)与胶质细胞系源性神经营养因 子(91ial cell 1ine—deri ved neurotrophic factor，GDNF)对卜甲基4一苯 基1，2，3，6四氢毗啶(卜methyl一4一phenyl—l，2，3，6一tetrahydropyridi ne，MPTP) 损伤昆明(KM)小鼠中脑黑质多巴胺(dopamine，DA)能神经元早期保护作用。 方法：实验分两部分。第一部分：利用MPTP制备成年KM小鼠PD模型，单侧 纹状体立体定位注射GDNF或者PBS，一部分取中脑黑质节段，做连续冠状石蜡切 片，结合免疫组织化学染色方法，观察各组酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase， TH)、钙结合蛋白(CalbindinD28k，CB)的表达，光镜观察并细胞计数，统计学 分析；另一部分取中脑黑质组织匀浆，行TH、cB的Western blot检测，用LabWorks 软件分析处理。第二部分：同样利用MPTP制备成年I(M小鼠PD模型，分实验组， 腹腔注射氯化锂；对照组，腹腔注射PBS。在动物存活一周后，一部分取中脑黑质 节段，固定、包埋做连续冠状石蜡切片，以免疫组织化学染色方法，显示各组TH 和CB表达阳性细胞，光镜观察并细胞计数，统计学分析；另一部分耿中脑黑质组 织匀浆，行TH、cB的Western blot检测，用LabWorks软件分析。 结果：(1)免疫组织化学染色结果显示GDNF组KM小鼠黑质致密部TH与cB 阳性神经元数量显著多于注射PBS组(PO．01)。Western blot免疫印迹结果显示 GDNF组的TH、CB蛋白含量表达水平显著多于注射PBS组(PO．05)。(2)免疫组织 化学染色结果显示实验组小鼠黑质致密部TH与cB阳性神经元数量显著多于对照 组(PO．01)，Western blot免疫印迹结果显示LiCL组的TH、CB蛋白含量表达水 2 徐州医学院硕士学位论文平显著多于对照组(PO．05)。 徐州医学院硕士学位论文 平显著多于对照组(PO．05)。 结论：(1)GDNF对成年PDKM小鼠黑质DA能神经元具有保护作用，且这种保 护作用可能与TH、细胞内cB表达增加有关。(2)氯化锂对成年PD KM小鼠黑质 DA能神经元具有保护作用，且这种保护作用可能与TH、细胞内cB表达增加有关。 关键词： 氯化锂；胶质细胞系源性神经营养因子；帕会森病；卜甲基4一 苯基l，2，3，6四氢吡啶；多巴胺能神经元： 徐州医学院硕士学位论文Experimental 徐州医学院硕士学位论文 Experimental study on the protection effect of Lithium Chloridea and intrasteiatal injecting GDNF on the DA neurons of PD mice ABSTRACT Objective This Stud