细胞衰老与凋亡1学时.PPTVIP

第十二章 细胞凋亡与衰老 1972年 Kerr提出细胞凋亡概念 亦称“程序性细胞死亡” 2002年 Brenner, Sulston 和Horvitz用线虫作为实验模型，实现对器官发育过程中细胞分裂、分化的原位观察，绘制细胞图谱，发现并研究了调控器官发育程序性细胞死亡的关键基因及其功能——2002年的诺贝尔生理医学奖 第一节 细胞凋亡的特征与分子机制 一、细胞凋亡的形态学与生物化学特征 （一）形态学特征 ◆凋亡的起始： 细胞表面的特化结构如微绒毛消失，细胞间接触的消失，但细胞膜依然完整；线粒体大体完整，但核糖体逐渐从内质网上脱离，内质网囊腔膨胀，并逐渐与质膜融合；染色质固缩，形成新月形帽状结构等形态，沿着核膜分布 ◆凋亡小体的形成： 核染色质断裂为大小不等的片段，与某 些细胞器如线粒体一起聚集，为反折的细胞质膜所包围。细胞表面产生了许多泡状或芽状突起，逐渐形成单个的凋亡小体 ◆凋亡小体逐渐为邻近的细胞吞噬并消化 （二）细胞凋亡的生化特征 ◆一系列蛋白酶的级联反应 ◆细胞凋亡的主要特征是形成大小为180～200bp特征性的DNA ladders ◆凋亡细胞组织转谷氨酰胺酶tTG（tissue Transglutaminase）积累并达到较高水平 ◆钙离子发挥作用 细胞凋亡与坏死的区别 ●二者的主要区别是： 细胞凋亡过程中，细胞质膜反折，包裹断裂的染色质片段或细胞器，然后逐渐分离，形成众多的凋亡小体（apoptotic bodies），凋亡小体则为邻近的细胞所吞噬。整个过程中，细胞质膜的整合性保持良好，死亡细胞的内容物不会逸散到胞外环境中去，因而不引发炎症反应。 相反，在细胞坏死时，细胞质膜发生渗漏，细胞内容物，包括膨大和破碎的细胞器以及染色质片段，释放到胞外，导致炎症反应。 三、细胞凋亡发生的三个阶段 （一）细胞凋亡信号转导 1、死亡受体介导的凋亡通路 2、线粒体/细胞色素c介导的细胞凋亡 （二）细胞凋亡基因的激活、表达和调控 （三） 细胞凋亡的效应阶段 （四）凋亡小体的清除 四、影响细胞凋亡的因素 （一）生理性因子 （二）病原微生物 （三）理化因素 （四）金属离子 （五）抗肿瘤药物 五、细胞凋亡的检测 形态学观测：染色法、透射和扫描电镜观察 DNA电泳：DNA片段就呈现出梯状条带 TUNEL测定法，即DNA断裂的原位末端标记法 细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL）。 彗星电泳法（comet assay） 流式细胞分析 根据凋亡细胞DNA断裂和丢失，采用碘化丙啶使DNA 产生激发荧光，用流式细胞仪检出凋亡的亚二倍体细 胞，同时又能观察细胞的周期状态。 第二节 细胞凋亡在药物开发中的应用远景 一、细胞凋亡异常与疾病 （一）细胞凋亡不足 肿瘤 自身免疫疾病 （二）细胞凋亡过渡 神经元退行性疾病 获得性免疫缺陷综合症 二、细胞凋亡药物的应用远景 （一）受体型药物 （二）Caspase家族靶标药物 （三）Bcl-2靶标药物 （四）信号分子靶标药物 （五）线粒体膜通透性靶标药物 （六）细胞凋亡与抗癌药 第三节 细胞衰老 一、细胞衰老的机制 自由基 线粒体DNA损伤 遗传程序 免疫衰老 神经-内分泌学说 二、抗衰老药物 （一）防御自由基损害的药物 SOD 硒与谷胱甘肽过氧化物酶 维生素E 维生素C Β-胡萝卜素 （二）免疫调节剂 （三）微量元素 （四）激素类药 End * *