光合色素的色层分析.DOC

七年　　班　　號姓名 七年　　班　　號 姓名 前言： 　　光合作用是這世界上最重要的化學反應之一，沒有了光合作用這世界最基礎的能量流轉以及有機和無機物的轉換便會停止，這便使得生命體將會無法存活。透過光合作用可以讓綠色植物利用光能，在葉綠體內將CO2、水及無機物合成為有機養分，葉綠體內利用色素來行光合作用，最主要的光合色素為葉綠素ａ，而葉綠素ｂ、葉黃素以及胡蘿蔔素是輔助吸收光能給葉綠素ａ，稱輔助色素。 實驗目的： 利用簡易的濾紙色層分析，分離及檢定光合作用色素（葉綠素ａ、葉綠素ｂ、類胡蘿蔔素）的種類。 實驗原理： 簡易濾紙色層分析法 依溶劑對不同色素的溶解程度及分配能力的差異性原理，以分離各種溶質。 色層分析是研究蛋白質、脂質以及植物色素最重要的一個技術，此技術可以依據分子對親水性的固定相以及厭水性的移動相的相對親和力將不同分子分開。 濾紙色層分析已經被廣為使用，因為這是最簡易的色層分析法，其移動相與固定相皆為液體，移動相為一或數種混合的有機溶劑，具適當極性，固定相為附著於多孔濾紙的水，利用物質在兩相間產生不同比例的分配性質。物質依其分配係數停留於特定位置，物質與移動相所行距離比稱為Rf值。 濾紙上物質移動距離 Rf = 濾紙上移動相移動距離 Rf值依各物質的特性及有機溶劑的差異各有不同，在同一條件下，相同物質必有相同Rf值，但具相同Rf值不一定只含此一物質。 實驗材料： 濾紙　　　　　１張　　　　　毛細管　　　１支　　　　　　菠菜葉　　　　３ｇ ８０％丙酮 ３０ｍｌ　　　研缽　　　　１套　　　　　 實驗步驟： 將菜葉砌碎。 加約0.5ml至1.0ml的酒精或丙酮，然後用研缽將葉磨爛來抽取葉綠素。 將濾紙圓心用鉛筆做上記號。 用乳頭吸管抽取葉綠素，然後點在濾紙中央鉛筆記號處，用吹風機吹乾，重覆這驟直至那一點變成深色為止。 將適量的酒精或丙酮緩慢滴在濾紙中央，必須前一滴已被濾紙吸收並略乾後，才可再加第二滴。 重複上述步驟直至顏色被伸展開來。 觀察並紀錄各層顏色的變化，憑不同顏色分別辨認不同的色素。 實驗結果： 將展開後的濾紙顏色紀錄下來 問題討論： 一、葉子為什麼通常是綠色的？ Ans： 二、為什麼葉子會呈現不同的顏色？ Ans： 三、在外圍與在內圈的顏色有何不同？各代表哪一種色素？為何有些在內圈有些在外圈？ Ans： 實驗二：孢子印製作 選取成熟開傘的子實體，去除菌柄，將菌蓋置於白色或深色紙上，再蓋上培養皿或其它器皿，靜置8小時以上，成堆的孢子掉落於紙上即形成孢子印，孢子印顏色是鑑定種類的重要依據。